[发明专利]层析柱组件

说明书

本发明涉及一种层析柱组件，其提供了用于执行层析分离的可承受的自装填的柱。层析柱组件包括具有在大致相对的端部处的第一开口和第二开口的柱管，以及具有卡扣配合设计或栓接设计的端盖。柱组件还包括接合器轴，其通过端盖插入柱中以用于实现期望的底座容积。柱组件还可包括包围第二开口的第二端盖，且可选的接合器轴可通过第二端盖插入柱中，允许底座容积的进一步调整。

本申请为2016年3月25日进入中国国家阶段的PCT申请“层析柱组件”（申请号：201480053202.0，申请人：通用电气健康护理生物科学股份公司）的分案申请。

技术领域

本发明涉及使用液体层析法提纯细胞组分，诸如蛋白质和/或缩氨酸。更具体而言，本发明涉及一种层析柱及用于提纯一种或多种细胞组分的套件，以及其使用方法。

背景技术

生物技术方法在蛋白质、缩氨酸、核酸和其它生物实体的研究中用于日益增加的范围。由于其通用性和对实体的灵敏度，故在此背景下，层析法通常是优选的提纯方法。层析法基于通过将混合物溶解在流动相(例如，如缓冲液的液体)中且使其穿过固定相(例如，可为珠/树脂的层析基质)来分离混合物的原理。更具体而言，包括目标实体(例如，化学/生物分子)的混合物引入移动相中，移动相然后与也称为层析基质的固定相接触。目标实体在其由移动相传送穿过固定基质时，然后将经历固定相与移动相之间的一系列相互作用。相互作用利用了混合物中的目标实体和其它组分的物理或化学性质的差异。

层析方法可在不同操作模式中运行。最简单的模式是批层析法，其中移动相添加到包含固定相的容器中；在适合时段内允许目标实体与固定相之间的相互作用；取回移动相；以及添加洗脱剂来释放目标实体。另一方面，在柱层析法中，包含样本(混合物)的移动相加入包含固定相的柱的顶部。通过打开柱的下端处的出口，移动相穿过柱，在此期间，样本与固定相相互作用。通常通过在顶部应用少量洗脱剂且又允许洗脱剂由重力或使用层析法系统穿过柱来执行洗脱。

一旦在固定相上获得目标实体的适合负载，则液流从移动相变到洗脱剂，可选地具有一种或多种中间洗液，且在柱的出口处从洗脱剂回收目标部分。洗脱剂通常包括梯度，诸如盐或pH梯度。为了避免较大污染物的污染且获得柱各处的有利液体分布，入口通常配备有过滤器和机械液体分送器器件。更常见的是，出口将类似地存在过滤器和一些机械液体分送器器件。

执行蛋白质提纯的许多研究者使用基本层析法系统或通过人工方法。由于工作流的强制性，故这些使用者中的大多数采用自装填的空柱，对其自己的柱装填其选择的介质。许多销售者在此领域提供空柱。Bio-Rad提供Econo品牌下的低压层析柱。这些是具有流接合器的玻璃柱，且经得起小于1巴的低操作压力。Pall Corporation提供LRC柱，其可经得起10到30巴的操作压力。其螺纹锁系统允许活塞的快速粗略调整，随后精细调整(这给予了各种底座高度的覆盖)。

选择装填其自己的柱的使用者在低压柱节段中的有限压力规格、可承受性、易用性、具有接合器的端盖的复杂设计和柱的尺寸/规模的限制方面面临不断的挑战。存在对于更加用户友好且可经得起较高柱压力的良好的层析柱设计的需要。

发明内容

本文公开了新颖层析柱设计和使用此的方法。因此，本发明的第一方面在于提供结合新颖端盖设计的自装填的层析柱组件，其适用于生物分子(诸如蛋白质和/或缩氨酸)从初始生物材料的提纯。

本发明的特定方面提供了一种用于柱组件的新颖端盖，其为卡扣配合端盖。此柱可采用达到2巴的背压。

本发明的另一个特定方面提供了一种用于柱组件的新颖端盖，其为具有使用固持件或卡簧的栓接设计。此柱可采用达到5巴的背压。

本发明的第二方面在于提供一种使用包括根据本发明的某些实施例的新颖端盖的自装填层析柱组件对生物分子层析分离的方法。

本发明的第三方面提供了一种用于制作层析柱组件的套件，该套件包含根据本发明的某些实施例的新颖端盖构件。