[发明专利]一种白桦胚性愈伤组织诱导培养基、诱导胚性愈伤组织的方法及组培苗的培育方法

权利要求书

1.一种白桦胚性愈伤组织诱导培养基，其特征在于，以MS培养基为基本培养基，由以下含量组分组成：2,4-D 2mg/L、NAA 0.2mg/L、琼脂5.5g/L和蔗糖40g/L；

所述胚性愈伤组织诱导培养基的pH值为5.8。

2.一种基于白桦未成熟胚诱导胚性愈伤组织的方法，包括：选取白桦未成熟胚进行消毒，将消毒的白桦未成熟胚接种于权利要求1所述的胚性愈伤组织诱导培养基上，在24～26℃下进行光暗交替培养，继代培养4周，得到胚性愈伤组织；所述光暗交替培养过程中，光培养的时间为16h，暗培养的时间为8h；

所述光暗交替培养的暗培养基，以MS培养基为基本培养基，由以下含量组分组成：4％蔗糖、5.5g·L^-1琼脂和2.0mg·L^-12,4-D和0.2mg·L^-1NAA；

所述光暗交替培养过程中，光照强度为36μmol·m^-2·s^-1。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述未成熟胚为授粉15～25d的球型至心型期的未成熟胚。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述消毒的方法包括：将未成熟的胚依次用酒精溶液浸泡，用水冲洗后，再与次氯酸钠溶液混合消毒后，用水冲洗；所述酒精溶液的体积浓度为70％，浸泡时间为30s；所述次氯酸钠溶液的质量浓度为3％，消毒时间为10min。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在用次氯酸钠溶液混合消毒时，还包括加入占次氯酸钠溶液总体积0.02％的吐温-20。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述光暗交替培养过程中，光照强度为36μmol·m^-2·s^-1。

7.一种组培苗的培育方法，包括如下步骤：

a.将权利要求2～6任一项所述方法制备得到的胚性愈伤组织接种至体细胞胚诱导培养基上在25℃培养2个月，得到白桦体细胞胚；

b.将所述步骤a得到的白桦体细胞胚接种至生根培养基上在25℃培养1～2个月，得到白桦再生组培苗；

所述步骤a中体细胞胚诱导培养基以1/2MS培养基为基本培养基，还包括以下含量组分：BA 0.5mg/L和NAA 0.1mg/L；

所述步骤b中生根培养基以WPM培养基为基本培养基，还包括以下含量组分：琼脂5.5g/L和蔗糖40g/L。