[发明专利]一种南极磷虾中氨基酸的检测方法

说明书

本发明公开了一种南极磷虾中氨基酸的检测方法，包括如下步骤：将南极磷虾充分研磨，向南极磷虾粉末中加入无水乙醇和水，对南极磷虾中的三种氨基酸进行超声提取，超声提取设定时间，取上清液，即得提取液，无水乙醇与水的体积比为3‑5:1，三种氨基酸为精氨酸、赖氨酸和组氨酸。该方法可以对南极磷虾中的三种带有正电荷的氨基酸含量进行准确检测，为分析各种氨基酸可能存在的作用，各种氨基酸之间存在的关系以及各带正电荷的氨基酸与阴离子之间的相关性研究提供保证。

技术领域

本发明属于南极磷虾检测技术领域，具体涉及一种南极磷虾中氨基酸的检测方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

南极磷虾是一种在南极水域中以群居方式生存的甲壳类动物，属节肢动物门，甲壳纲，磷虾目，现有文献记载，当动物从低浓度培养环境转移至高浓度环境时游离氨基酸含量有所升高，因此猜测离子与游离氨基酸之间存在着一定的相关性。

精氨酸是甲壳动物体内一种必需氨基酸，参与构成机体蛋白质，在一氧化氮酶的作用下生成信号分子一氧化氮，一氧化氮参与调解神经系统。精氨酸同样是南极磷虾体内调解生殖功能的一种重要氨基酸，对雌雄生殖过程都有着重要的作用。精氨酸在甲壳动物体内也是一种与储能有关的重要物质，在较多能量产生的情况下，在精氨酸激酶的作用下，精氨酸与ATP结合生成磷酸精氨酸储存能量。在能量供应不足情况下，磷酸精氨酸分解生成ATP支持细胞正常生理活动。赖氨酸为一种甲壳类动物必需氨基酸，与南极磷虾的生长过程密切相关。赖氨酸是组成神经内分泌复合物质肽激素的重要前体物质，参与调解甲壳动物体内的多种生理过程，包括有葡萄糖代谢及生殖代谢等过程。组氨酸同为南极磷虾的必需氨基酸，可通过收放质子调节pH值，组氨酸进过脱羧后可生成组胺，Mendoza发现适量的组胺添加对罗氏沼虾生长有促进作用，Tapia发现组胺和尸胺的适量添加对蓝对虾的生长有利。对南极磷虾中的氨基酸等成分主要的研究方向是南极磷虾资源的开发利用，探讨南极磷虾风味因素的研究较多，分析三种氨基酸对南极磷虾生长发育影响的较少。

现在对南极磷虾中氨基酸的测评主要集中在对其整虾、虾肉、虾头及虾壳的测定，氨基酸的测定方法共四大类，包括有化学法、分光光度法、色谱法及电化学法。化学法包括有甲醛滴定法及凯氏定氮法。其中，甲醛滴定法操作较为简单，但是滴定终点不容易确定，受此影响，准确度不高。与之对应的凯氏定氮法精确度较高但是操作复杂，测量周期比较长。凯氏定氮法主要是对氮元素进行测定，不能对测定多种氨基酸。分光光度法根据不同物质吸光度不同的特性来进行测量，这种方法操作简单，但是误差大。色谱法包括有气相色谱法、液相色谱法和毛细管电泳色谱法四种。电化学法根据不同物质的电化学性质不同的特性进行测量，在测定时需要根据测量氨基酸的种类，对应不同的电极，这种方法简单，灵敏度高，但是重现性较差。

发明内容

针对上述现有技术中存在的技术问题，本发明的目的是提供一种南极磷虾中氨基酸的检测方法。

为了解决以上技术问题，本发明的技术方案为：

一种南极磷虾中氨基酸的检测方法，包括如下步骤：

将南极磷虾充分研磨，向南极磷虾粉末中加入无水乙醇和水，对南极磷虾中的三种氨基酸进行超声提取，超声提取设定时间，取上清液，即得提取液，无水乙醇与水的体积比为3-5:1，三种氨基酸为精氨酸、赖氨酸和组氨酸。

试验发现，与单纯采用无水乙醇(采用加热回流方法或超声提取方法)对南极磷虾中的氨基酸进行提取相比，用无水乙醇和水的混合液进行提取时，更容易提高三种氨基酸的提取纯度和提取量。

在一些实施例中，还包括将冷冻的南极磷虾解冻后，根据其体长不同，将其分为1期、2期、3期、4期和5期五个不同生长时期的南极磷虾，分别对五个不同生长时期的南极磷虾进行三种氨基酸的检测。