[发明专利]一种眼干症双联快速检测试剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种眼干症双联快速检测试剂及其制备方法，包括PVC底板，所述PVC底板的顶部从左到右依次设置有样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫。本发明通过检测泪液中的乳铁蛋白和MMP9的含量，当出现乳铁蛋白阴性或MMP9阳性时，提示患者眼干症的可能，当乳铁蛋白检测阳性，提示患者泪腺功能正常，当MMP9阳性，提示患者眼部存在感染，以便将眼干症患者同其他早期眼疾患者区分，避免误诊，其泪液采取方便、工艺简单、重复性好、成品结构稳定、使用性能佳，且其能同时检查两种与眼干症相关的蛋白或酶，提高诊断效率、减少人工、检测速度快、灵敏度高、对患者基本没有任何伤害、耐受性好，非常适合医院来解决临床眼干症患者检测和诊断难题。

技术领域

本发明涉及医疗检测技术领域，具体为一种眼干症双联快速检测试剂及其制备方法。

背景技术

泪液不仅有消毒杀菌的作用，它还可在眼球的表面形成泪膜，有润滑和使角膜光滑透亮、保持角膜屈光系统的重要功能，如果泪液分泌太少，角膜就得不到滋润，整个眼球干燥无光，即形成眼干症，眼干症是指任何原因造成的泪液质或量异常或动力学异常，导致泪膜稳定性下降，并伴有眼部不适和/或眼表组织病变特征的多种疾病的总称，又称角结膜干燥症，常见症状包括眼睛干涩、容易疲倦、眼痒、有异物感、痛灼热感、分泌物黏稠、怕风、畏光、对外界刺激很敏感。

现有的检测方法过多依赖于检验人员的经验，不利于作出数据判断，根据《干眼临床诊断专家共识》-2013及《欧洲严重干眼诊断共识》，均表明眼干症患者与其泪液中乳铁蛋白含量及MMP9含量相关。

临床上眼干症的主要检查方法有泪液分泌实验、泪膜破裂时间、泪液蕨类试验、角结膜上皮染色、印迹细胞学检查、溶菌酶含量、乳铁蛋白含量等，其中，前两项检测是比较快速简便的方法，也是临床上最常用的检测方法，但这两种方法也有各自的缺点，泪液分泌实验将测试滤纸放入眼内穹窿部，难以避免一些外界的因素刺激，泪液分泌量不稳定，重复性差，由此判断干眼的标准很难确定，增加测试的特异性，敏感度就会降低，泪膜破裂时间敏感度很高，但它的特异性较低，因此，泪膜破裂时间也只作为诊断干眼的参考，为此，我们提出一种眼干症双联快速检测试剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种眼干症双联快速检测试剂及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种眼干症双联快速检测试剂，包括PVC底板，所述PVC底板的顶部从左到右依次设置有样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜检测垫和吸水垫，且硝酸纤维素膜检测垫的内表面从左到右依次设置有乳铁蛋白检测线、MMP9检测线和质控线，所述胶体金标记垫的左侧位于样品垫的内侧，且硝酸纤维素膜检测垫的左侧位于胶体金标记垫的内侧，硝酸纤维素膜检测垫的右侧位于吸水垫的内侧。

优选的，所述胶体金标记垫的材质为聚酯膜，样品垫材质为聚酯膜或玻璃纤维素膜。

一种眼干症双联快速检测试剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：

A、制备样品垫：将样品垫置于处理液中浸泡，然后将含有处理液的样品垫置于温度为18-24℃、相对湿度小于40％的环境中烘干16-24h，备用；

B、制备胶体金标记垫：胶体金溶液、抗体标记及胶体金标记垫制备；

C、制备硝酸纤维素膜检测垫：①、按照配方要求配置好质控线、乳铁蛋白检测线和MMP9检测线的抗体溶液，且最终抗体溶液浓度为1.0-1.2mg/ml；②取硝酸纤维素膜(规格宽度25mm)，按照距离间隔一次性划出乳铁蛋白检测线、MMP9检测线和质控线，划膜时，抗体溶液的消耗量设定为1.0-1.2ul/cm，乳铁蛋白检测线包被有鼠抗乳铁蛋白单克隆抗体3，MMP9检测线包被有鼠抗MMP9单克隆抗体4，质控线包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体；