[发明专利]高通量基因合成法提高食气梭菌一氧化碳利用率的方法

权利要求书

1.一种工程化的食气梭菌，其特征在于，所述工程化的食气梭菌中，含有一载体，所述载体中含有用于表达外源血红蛋白的表达盒。

2.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述工程化的食气梭菌其一氧化碳利用率≥30.0%。

3.如权利要求2所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述工程化的食气梭菌其一氧化碳利用率≥37.5%。

4.如权利要求2所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述工程化的食气梭菌其一氧化碳利用率≥40%。

5.如权利要求2-4中任一所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述的利用率是指发酵全程所消耗的一氧化碳的物质的量比发酵全程所提供的一氧化碳的物质的量的总量所得的比率。

6.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述工程化的食气梭菌是工程化的食气扬氏梭菌。

7.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述载体是pMTL83151载体。

8.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述用于表达外源血红蛋白的表达盒中，包括编码外源血红蛋白的基因序列。

9. 如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述血红蛋白的来源选自下组：智人(Homo sapiens)、水稻(Oryza sativa)、大豆(Glycine max)、分枝结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、集胞藻(Synechocystis sp.) PCC 6803、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、空肠弯杆菌(Campylobacter jejuni)，或透明颤菌(Vitreoscilla sp.)C1。

10.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述血红蛋白的来源为：空肠弯杆菌或透明颤菌。

11.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述外源血红蛋白是来源于空肠弯杆菌的CGb或来源于透明颤菌的VHb。

12.如权利要求1所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述用于表达外源血红蛋白的表达盒中，还包括启动子、终止子，和/或rbs区域。

13.如权利要求12所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述的启动子选自下组：Pthl9、P1339、P1440，或其组合。

14.如权利要求12所述的工程化的食气梭菌，其特征在于，所述的启动子为Pthl9启动子。

15.一种如权利要求1所述的工程化的食气梭菌的制备方法，其特征在于，包括步骤：将用于表达外源血红蛋白的表达盒可操作地插入一食气梭菌中，从而获得如权利要求1所述的工程化的食气梭菌。

16.一种如权利要求1所述的工程化的食气梭菌的用途，其特征在于，用于制备一发酵种子液，所述发酵种子液用于在利用钢厂尾气生产乙酸和乙醇的发酵过程中提高一氧化碳的利用率。

17.如权利要求16所述的用途，其特征在于，所述一氧化碳的利用率可被提高35%。