[发明专利]一种鸡传染性鼻炎(A型+B型+C型)、鼻气管鸟疫杆菌病(A型)二联灭活疫苗

说明书

本发明涉及一种鸡传染性鼻炎(A型+B型+C型)、鼻气管鸟疫杆菌病(A型)二联灭活疫苗及其制备方法。本发明利用自行分离鉴定的副鸡禽杆菌A型、B型、C型菌种，鼻气管鸟疫杆菌A型菌株，分别接种适宜培养基培养，收获培养物，经甲醛溶液灭活后浓缩，几种抗原按照一定比例混合均匀，加入矿物油佐剂乳化制备而成。本发明所提供的疫苗能够有效预防由副鸡禽杆菌A型、B型、C型菌引起的鸡传染性鼻炎以及由鼻气管鸟疫杆菌A型菌引起的鸡鼻气管鸟疫杆菌病。这两种疫病都属于鸡呼吸系统疾病，临床症状相似，危害很大，本发明可以同时防控两种疫病，具有重要的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种鸡传染性鼻炎(A型+B型+C型)、鼻气管鸟疫杆菌病(A型)二联灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品领域。

背景技术

鸡传染性鼻炎是由副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)引起的一种急性上呼吸道传染病，可以引起鸡眶下窦及周围肿胀、流鼻涕、流泪及育成鸡生长不良和产蛋鸡产蛋下降10％～40％，给养殖户造成严重的经济损失。

根据Page的凝集试验分型方案，副鸡禽杆菌可分为A、B、C三个血清型。A、B、C型均具有不同程度的致病性。我国于1986年由冯文达首次报道本病，用玻片凝集、HA和HI试验证明分离到的副鸡禽杆菌为血清型A型菌株(冯文达，北京鸡传染性鼻炎病原菌分离及鉴定[J]，微生物学通报，1987，5：216-219.)。此后陆续报道从我国分离鉴定出副鸡禽杆菌A型、B型、C型菌。2015年～2016年，赵国生等从全国各地送检病鸡中分离得到77株细菌，经分离鉴定、PCR方法检测确定为副鸡嗜血杆菌，进一步利用血清平板凝集试验进行分型，结果：A型10株，B型63株，C型4株(赵国生，何晓玲，关飞等，2015年以来我国部分地区鸡传染性鼻炎流行病学调查[J]，中国家禽，2016，38(16)：77-79.)。

副鸡禽杆菌分为A型、B型、C型3种血清型，不同血清型间免疫关系相距较远。2006～2017年间我公司实验室从山东、河北等地区分离了41株副鸡禽杆菌菌株，其中血清A型28株、B型10株、血清C型3株。流行病学结果表明我国存在A、B、C三个血清型菌株引起的鸡传染性鼻炎，研制的疫苗中需包含三种血清型菌株。

鼻气管鸟疫杆菌病是由鼻气管鸟疫杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)引起的禽呼吸道细菌病。鼻气管鸟疫杆菌病主要引起鸡呼吸系统发病，临床表现精神沉郁、采食减少，一过性流鼻涕、打喷嚏、面部水肿；常发生坏死性肺炎、气囊炎、支气管炎，常合并、继发病毒、细菌和真菌感染，从而引起急性死亡，危害很大，是一种值得重视的新病。

Charlton等1993年首先对鼻气管鸟疫杆菌进行了鉴定。陈小玲等从我国分离鉴定出鼻气管鸟疫杆菌(陈小玲、宋程等，鼻气管鸟疫杆菌中国株的鉴定，中国家禽，2004年第26卷第18期)，利用琼脂扩散和酶联免疫吸附试验，将分离株分成18个血清型，用A～R依次命名，其中血清A型是迄今最流行的血清型。鸡源分离株大多是A型，从火鸡体内分离的菌株多为A、B和D型，所有血清型(A、B、C、D、E)都有不同程度的交叉反应(赵鹏，李佳，谢琛，等.家禽鼻气管鸟疫杆菌研究进展[J].中国家禽，2015，37(6)：37-41.)。赵鹏，李佳，谢琛等报道对我国多个地区的鸡群血清样品检测结果表明，我国不同地区和不同家禽品种均有不同程度感染。(赵鹏，李佳，谢琛，等.家禽鼻气管鸟疫杆菌研究进展[J].中国家禽，2015，37(6)：37-41.)。

2013～2016年间，我公司实验室从广东、广西、云南、山东地区送检的病料分离出6株鼻气管鸟疫杆菌，经血清型鉴定，均为A型。