[发明专利]一种均相化学发光检测试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 201910651533.9 | 申请日: | 2019-07-18 |
| 公开(公告)号: | CN110736735A | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
| 发明(设计)人: | 杨阳;赵卫国;刘宇卉;李临 | 申请(专利权)人: | 博阳生物科技(上海)有限公司;科美诊断技术股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/76 | 分类号: | G01N21/76;G01N21/01 |
| 代理公司: | 11372 北京聿宏知识产权代理有限公司 | 代理人: | 刘建军;吴大建 |
| 地址: | 201210 上海市浦东新区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 微球 供体 粒径 试剂盒 生物分子 微球表面 活性氧 包被 化学发光检测试剂盒 待测目标分子 化学发光信号 特异性结合 标记物 可检测 灵敏度 激发 应用 | ||
1.一种均相化学发光检测试剂盒,其包括:
供体试剂,其包括供体微球,所述供体微球能够在激发状态下生成活性氧,且所述供体微球表面包被有标记物;和,
受体试剂,其包括受体微球,所述受体微球能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号,且所述受体微球表面包被有生物分子,所述生物分子能够与待测目标分子特异性结合;
其中,所述供体微球的粒径大于所述受体微球的粒径。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述供体微球的平均粒径为100nm-400nm,受体微球的平均粒径为100nm-350nm,且所述供体微球的平均粒径与所述受体微球的平均粒径比为1.1-4.0;
优选地,所述供体微球的平均粒径为190nm-250nm,受体微球的平均粒径为180nm-240nm,且所述供体微球的平均粒径与所述受体微球的平均粒径比为1.2-3.0。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述供体微球平均的粒径为150nm,受体微球的平均粒径为100nm,且所述供体微球的平均粒径与所述受体微球的平均粒径比为1.5。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述供体微球包括第一载体,所述第一载体的内部填充有敏化剂,所述第一载体的表面化学键合标记物。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质,其直接化学键合标记物。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述标记物为亲和素;优选地,所述亲和素选自卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素、中性亲和素和类亲和素;进一步优选选自中性亲和素或链霉亲和素。
7.根据权利要求6中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述亲和素通过氨基与所述第一载体表面的醛基反应形成席夫碱的方式化学键合在所述第一载体的表面。
8.根据权利要求5-7中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述第一载体的表面带有键合官能团,所述键合官能团用于将标记物化学键合在所述第一载体的表面。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基;优选选自醛基和/或羧基;优选地,所述第一载体表面的键合官能团的含量为100~500nmol/mg,优选为200~400nmol/mg。
10.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述第一载体的表面包被有亲水性的醛基葡聚糖,所述醛基葡聚糖的醛基化学键合标记物。
11.根据权利要求4-10中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述光敏剂选自亚甲基蓝、玫瑰红、卟碄和酞菁中的一种。
12.根据权利要求1-11中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述受体微球包括第二载体,所述第二载体的内部填充有发光组合物,所述第二载体的表面包被有至少一层多糖层,所述多糖层的表面连接有生物分子。
13.根据权利要求12所述的试剂盒,其特征在于,所述第二载体的表面包被有亲水性的羧基葡聚糖。
14.根据权利要求12或13所述的试剂盒,其特征在于,所述发光组合物包括铕配合物;进一步优选地,所述铕配合物为MTTA-EU3+。
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