[发明专利]从血浆分离组分Ⅰ和Ⅲ中提取静注人免疫球蛋白的方法

权利要求书

1.一种两步法从血浆分离组分Ⅰ和Ⅲ中提取人免疫球蛋白IgG组分的方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）辛酸钠沉淀FⅠ+Ⅲ组分，去除杂蛋白；

（2）使用离子交换层析法进一步精制IgG组分；

其中，

步骤（1）所述的辛酸钠沉淀FⅠ+Ⅲ组分的步骤为：

FⅠ+Ⅲ沉淀按20%（wt）的浓度溶解于注射用水中，使用50mM辛酸钠，PH4.9条件沉淀FⅠ+Ⅲ组分中的杂质蛋白；

步骤（2）所述的使用离子交换层析法进一步精制IgG组分的步骤为：

1）Capto Q层析预处理步骤（1）制备得到的IgG溶液得IgG溶液1；

2）Capto Q XP层析处理IgG溶液1得IgG溶液2；

3）对IgG溶液2进行超滤浓缩，得IgG精制液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的沉淀FⅠ+Ⅲ组分中的杂质蛋白的步骤为：

（1）按设定量以常温注射用水完全搅拌溶解FⅠ+III沉淀后，边搅拌边加入辛酸钠至设定浓度；

（2）搅拌均匀后，测定并调整pH至4.9，20℃水浴持续搅拌2h，搅拌过程中保持pH值不变，搅拌完毕后继续20℃水浴静置2h；

（3）沉淀完毕后，3500g离心，将静置上清以50p滤板过滤，最后用0.22um的滤膜过滤。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的Capto Q层析的具体步骤为：

（1）使用缓冲液A（200mM NaAC-HAC，pH5.4）、缓冲液B（10mM NaAC-HAC，pH5.4）分别平衡2~5个柱体积，流速150cm/h；

（2）100cm/h上样并收集滤液得IgG溶液1；

（3）清洗封存层析柱。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的Capto Q XP层析处理IgG溶液1的步骤为：

（1）使用缓冲液D（200mM NaAC-HAC，pH6.0）、缓冲液E（10mM NaAC-HAC，pH6.0）分别平衡2~5个柱体积，流速150cm/h；

（2）75cm/h上样IgG溶液1并收集滤液得IgG溶液2；

（3）清洗封存层析柱。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的对IgG溶液2进行超滤浓缩的步骤为：用30kDa膜包超滤浓缩至IgG浓度不低于50mg/ml。