[发明专利]一种以食用菌分泌乙醛脱氢酶的基因工程菌

权利要求书

1.一种用于增强人体胃肠道内酒精代谢的食品级基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为Lactococcuslactis NZ3900-pNZ8149-sig-ALDH2，2019年1月29日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，其保藏号为CCTCC No：M 2019091。

2.根据权利要求1所述用于酒精代谢的食品级基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是将用于表达分泌型乙醛脱氢酶的基因片段转入乳酸乳球菌NZ3900菌株得到的，所述表达分泌型乙醛脱氢酶的基因片段为SEQ ID NO.1中的核苷酸序列。

3.根据权利要求2所述的用于酒精代谢的食品级基因工程菌，其特征在于，构建时将SEQ ID NO.1中的核苷酸序列与表达载体pNZ8149通过酶切位点NcoI和SpeI连接得到重组表达载体pNZ8149-sig-ALDH2，将所述重组表达载体转化至宿主菌中，得到所述用于酒精代谢的基因工程菌。

4.根据权利要求2所述用于酒精代谢的基因工程菌，其特征在于，所述表达分泌型乙醛脱氢酶基因的片段中还包括核糖体结合位点（RBS）和用于表达信号肽（Signal peptide）的序列，所述信号肽用于将乙醛脱氢酶引导至乳酸乳球菌细胞外。

5.一种产乙醛脱氢酶基因工程菌的生产方法，其特征在于，将权利要求1所述的基因工程菌接种至M17肉汤培养基中，25-37℃培养8-36小时。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基中应添加终浓度为0.1-100ng/ml的乳酸链球菌素（nisin），以诱导启动子开始表达乙醛脱氢酶。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基中应添加含有Zn²⁺终浓度为0.05-1g/ml的葡萄糖酸锌溶液，以提供乙醛脱氢酶活性所需的辅酶锌离子。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基中应添加氧化型辅酶I（NAD⁺），其终浓度为0.1-50mmol/L，以提供乙醛脱氢酶催化反应的氢受体（氢负离子，:H^-）。

9.权利要求1所述的基因工程菌在制备含乙醛脱氢酶的产品中的应用。

10.权利要求2所述的基因在制备含乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的解酒食品或者保健品中的应用。