[发明专利]一种利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法在审
| 申请号： | 201910523205.0 | 申请日： | 2019-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN110229755A | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 余旭亚;赵永腾 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12P7/64;C11B1/10;C11B3/16;C12R1/89 |
| 代理公司： | 北京众泽信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11701 | 代理人： | 张艳萍 |
| 地址： | 650500 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黑素 藻细胞 诱导 微藻油脂 氮胁迫 单针 高光 母液 微藻 稀释 藻液 生物技术领域 有机溶剂提取 葡萄糖 对数生长期 基础培养基 微藻生长 无水乙醇 异养培养 诱导培养 培养基 产业化 生物量 重悬浮 积累 配制 光照 生长 保证 | ||
1.一种利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法，其特征在于：具体步骤如下：
(1)诱导藻液的制备：在温度为24～26℃条件下，以10g/L葡萄糖为碳源的BG-11基础培养基异养培养单针藻，待单针藻生长至对数生长期后期收集藻细胞，用缺氮的BG-11培养基稀释重悬浮藻细胞至0.7g/L作为诱导藻液；
(2)诱导藻细胞积累油脂：用无水乙醇配制10mmol/L的褪黑素母液，将褪黑素母液添加到步骤(1)的诱导藻液中稀释褪黑素浓度为10-80μmol/L，并置于温度为24～26℃诱导培养；
(3)利用有机溶剂提取步骤(2)藻细胞内的油脂。
2.根据权利要求1所述的利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法，其特征在于：单针藻为单针藻菌株Monoraphidium sp.QLY-1(NCBI：KM199735)。
3.根据权利要求1所述的利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法，其特征在于：步骤(2)中光照强度为100～120μmol·m-2·s-1。
4.根据权利要求1所述的利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法，其特征在于：步骤(3)中有机溶剂为氯仿-甲醇溶液。
5.根据权利要求4所述的利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法，其特征在于：所述氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比为1:2。
6.根据权利要求4所述的利用褪黑素促进高光缺氮胁迫下微藻油脂积累的方法，其特征在于：步骤(3)中提取藻细胞内的油脂的方法为：将培养液经5000r/min离心富集5min，用蒸馏水反复洗涤3次后冻干制成干藻粉，称重；加入石英砂并研磨混匀，再加入氯仿-甲醇溶液重复抽提至藻体发白，离心收集有机相即得油脂；其中石英砂的质量为干藻粉质量的2倍。
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