[发明专利]一种检测丁酰胆碱酯酶的一体化反应器及质谱检测方法

说明书

本公开提供了一种检测丁酰胆碱酯酶的一体化反应器及质谱检测方法，包括移动装置、反应纸条、检测纸条、样品输入部件、电压导针；所述移动装置安装在反应纸条上，所述移动装置为能够使反应纸条接触检测纸条或远离检测纸条的装置；所述反应纸条负载丁酰胆碱酯酶探针，所述丁酰胆碱酯酶探针包括金纳米颗粒和式Ⅰ所示化合物，金纳米颗粒和式Ⅰ所示化合物通过Au‑S键连接，所述检测纸条设有能够与纸喷雾质谱检测装置配合的尖端；所述样品输入部件为能够将检测样品输送至反应纸条的装置，所述样品输入部件与反应纸条配合；所述电压导针为能够将高压直流电源提供的电压提供给检测纸条的导针。

技术领域

本公开属于分析检测技术领域，涉及一种检测丁酰胆碱酯酶的一体化反应器及质谱检测方法。

背景技术

这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然构成现有技术。

丁酰胆碱酯酶(BuChE)主要由肝脏合成并立即释放到血浆中，因此血清中丁酰胆碱酯酶的活性是测定肝细胞蛋白质合成功能的灵敏指标。临床中，测定血清丁酰胆碱酯酶活性是诊断有机磷化合物如有机磷毒气、有机磷农药和可卡因等中毒的重要途径之一。另外，近年来研究表明，丁酰胆碱酯酶的活性与许多神经性疾病机制相关，如可用与协助阿尔茨海默症的诊断。因此，BuChE是一项重要的酶学指标，开发相应的检测装置具有重要的意义。

据本公开发明人研究了解，目前测定丁酰胆碱酯酶常用的测定方法有：pH指示剂试纸法、pH差示法、免疫分析法、连续监测法、比色法等。临床生化检验中以连续监测法和比色法应用最多，pH差示法由于方法简单，也较常用。连续监测法主要用自动生化分析仪测量血浆(血清)中的活力。将血浆(血清)样品与商品试剂盒溶液(主要成分为DTNB、碘化丁酰硫代胆碱和磷酸盐缓冲液)1：150混合后，通过连续监测反应体系90s内的吸光度变化来计算丁酰胆碱酯酶的活性。目前临床检验科即采用此检测方法，其特点是试剂商品化，不需终止反应，检验迅速，但对检验设备要求较高。Ellman比色法的原理为丁酰胆碱被丁酰胆碱酯酶水解生成丁酸和胆碱，胆碱与5,5-二硝基-双-2硝基苯甲酸(DTNB)生成黄色物质，通过对黄色物质的测定来推算反应体系中的丁酰胆碱酯酶的含量。此方法的灵敏度较高，但较易受到反应体系中其它物质的干扰而产生误差。pH差示法是用丁酰胆碱作基质，丁酰胆碱酯酶水解丁酰胆碱生成乙酸会引起pH值下降，通过pH的降低来计算酶活性。该法快速简单，但在测全血丁酰胆碱酯酶活性的时候需要抑制掉乙酰胆碱酯酶活性，否则会对结果产生影响。据本公开发明人研究发现，以上方法存在操作过程繁琐、误差较大、样品量大、成本较高、检测时间较长等缺陷。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本公开基于酶反应器的恒温保湿的特点以及质谱精确快速高通量的优势，建立快速高效的集反应和检测于一体的反应器质谱法检测丁酰胆碱酯酶，然而，现有技术中并没有关于检测丁酰胆碱酯酶一体化的反应器，从而难以实现快速高效的质谱法检测丁酰胆碱酯酶，因而本公开的目的是提供一种检测丁酰胆碱酯酶的一体化反应器及质谱检测方法。

为了实现上述目的，本公开的技术方案为：

一方面，一种检测丁酰胆碱酯酶的一体化反应器，包括移动装置、反应纸条、检测纸条、样品输入部件、电压导针；

所述移动装置安装在反应纸条上，所述移动装置为能够使反应纸条接触检测纸条或远离检测纸条的装置；

所述反应纸条负载丁酰胆碱酯酶探针，所述丁酰胆碱酯酶探针包括金纳米颗粒和式Ⅰ所示化合物，金纳米颗粒和式Ⅰ所示化合物通过Au-S键连接，

所述检测纸条设有能够与纸喷雾质谱检测装置配合的尖端；

所述样品输入部件为能够将检测样品输送至反应纸条的装置，所述样品输入部件与反应纸条配合；

所述电压导针为能够将高压直流电源提供的电压提供给检测纸条的导针。