[发明专利]生精片中枸杞子、柚皮苷和淫羊藿苷的薄层鉴别测定法有效
申请号: | 201910507799.6 | 申请日: | 2019-06-12 |
公开(公告)号: | CN110187046B | 公开(公告)日: | 2021-08-17 |
发明(设计)人: | 周英;徐会;杜平 | 申请(专利权)人: | 贵州联盛药业有限公司 |
主分类号: | G01N30/90 | 分类号: | G01N30/90 |
代理公司: | 成都市鼎宏恒业知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51248 | 代理人: | 谢敏 |
地址: | 563000 *** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 片中 枸杞子 柚皮苷 淫羊藿 薄层 鉴别 测定法 | ||
1.生精片中枸杞子、柚皮苷和淫羊藿苷的薄层鉴别测定法,其特征在于:所述生精片包括鹿茸、枸杞子、人参、冬虫夏草、菟丝子、沙苑子、淫羊藿、黄精、何首乌、桑椹、补骨脂、骨碎补、仙茅、金樱子、覆盆子、杜仲、大血藤、马鞭草和银杏叶,所述薄层鉴别测定法包括枸杞子薄层鉴别测定方法、柚皮苷薄层鉴别测定方法和淫羊藿苷薄层鉴别测定方法,所述枸杞子薄层鉴别测定方法包括对照组试剂制备、测定组试剂制备和薄层鉴别测定,所述对照组试剂制备包括以下步骤:
S1,取枸杞子1g,将其研细,添加10mL甲醇,进行提取;
S2,将S1提取后溶液在50℃水浴中浸泡30分钟后过滤,滤液即为对照组试剂;
所述测定组试剂制备包括以下步骤:
S1,取生精片4.7g,将其研细,加35mL水煮沸15min后,静置至室温,通过离心机进行离心10min,制得离心液;
S2,取离心液的上清液,通过乙醚和乙酸乙酯进行提取,先用乙醚15mL提取一次,乙醚液弃去得水液,水液用乙酸乙酯提取两次,每次15mL,合并乙酸乙酯液,浓缩至1mL,制得测定组试剂;
所述薄层鉴别测定包括以下步骤:
S1,取对照组试剂和测定组试剂各5μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,并通过展开剂进行展开,且展开剂为按照体积比为10:0.2的三氯甲烷和甲醇的混合溶剂;
S2,将展开后的硅胶G薄层板取出,晾干,并放置入熏蒸室通过氨蒸汽进行熏蒸;
S3,在紫外光灯下进行检视,在对照组试剂色谱和测定组试剂色谱相应的位置上,得到显示相同的颜色的荧光斑点;
所述柚皮苷薄层鉴别测定方法包括对照组试剂制备、测定组试剂制备和薄层鉴别测定,所述对照组试剂制备包括以下步骤:
S1,取1mg柚皮苷,添加1mL甲醇,制得对照组试剂;
所述测定组试剂制备包括以下步骤:
S1,取4.7g生精片,除去薄膜衣,将其研细,添加30mL甲醇,进行提取;
S2,将S1提取后溶液进行超声波处理20min,并过滤,蒸干,制得测定组残渣;
S3,将测定组残渣加水20mL进行溶解,并通过乙醚、乙酸乙酯和甲醇进行提取,先用乙醚提取3次,每次20mL,乙醚液弃去制得水液,在水液加乙酸乙酯提取2次,每次20mL,合并乙酸乙酯液,加5%碳酸氢钠20mL洗涤1次,乙酸乙酯液水浴蒸干,制得二次残渣,二次残渣加甲醇1mL使其溶解,制得测定组试剂;
所述薄层鉴别测定包括以下步骤:
S1,取对照组试剂和测定组试剂各5μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,并通过展开剂进行展开,且展开剂为按照体积比为1:12:2.5:3的甲苯、乙酸乙酯、甲酸和水的混合溶剂;
S2,将展开后的硅胶G薄层板取出,晾干,并喷以三氯化铝溶液;
S3,在紫外光灯下进行检视,在对照组试剂色谱和测定组试剂色谱相应的位置上,得到显示相同的颜色的荧光斑点;
所述淫羊藿苷薄层鉴别测定方法包括对照组试剂制备、测定组试剂制备和薄层鉴别测定,所述对照组试剂制备包括以下步骤:
S1,取1mg淫羊藿苷,添加1mL甲醇,制得对照组试剂;
所述测定组试剂制备包括以下步骤:
S1,取4.7g生精片,除去薄膜衣,将其研细,添加30mL甲醇,进行提取;
S2,将S1提取后溶液进行超声波处理20min,并过滤,蒸干,制得测定组残渣;
S3,将测定组残渣加20mL水进行溶解,先用乙醚提取3次,每次20mL,乙醚液弃去制得水液,在水液加乙酸乙酯提取2次,每次20mL,合并乙酸乙酯液,加5%碳酸氢钠20mL洗涤1次,乙酸乙酯液水浴蒸干,制得二次残渣,二次残渣加甲醇1mL使其溶解,制得测定组试剂;
所述薄层鉴别测定包括以下步骤:
S1,取对照组试剂和测定组试剂各5μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,并通过展开剂进行展开,所述展开剂为在10℃的环境下按照体积比为1.3:1:1的乙酸丁酯、甲酸和水的混合溶剂;
S2,将展开后的硅胶G薄层板取出,晾干,并喷以三氯化铝溶液;
S3,在紫外光灯下进行检视,在对照组试剂色谱和测定组试剂色谱相应的位置上,得到显示相同的颜色的荧光斑点。
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