[发明专利]电场捕获机理分离体液中外泌体的方法及微流控芯片

权利要求书

1.电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，包括以下步骤：

（1）采集体液；

（2）将体液和加入微流控芯片的加液口，通过微流控芯片的外加非均匀电场使得混合液中的粒子受到极化；

（3）根据外泌体和其他粒子极化程度的不同和液体流速将外泌体与其他粒子分离；其中相对的正负电极连线方向和液体流动方向呈锐角。

2.根据权利要求1所述的电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，当体液为血液时，（1）中要对其进行抗凝处理；当体液为血液或唾液时，（2）中要添加PBS缓冲溶液。

3.根据权利要求2所述的电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，当血液是全血时，对血液进行离心，提取上清液离心条件是1000-1200g离心5-10分钟。

4.根据权利要求1所述的电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，微流控芯片的交流信号源参数为5-15 Hz，5-15 Vpp；液体流速为1.7-2.3 μl/min。

5.权利要求3所述的电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，用EDTA抗凝管采集血样，采集以后将EDTA抗凝管来回颠倒混匀抗凝剂，然后室温放置5-10分钟，随后移出到离心管里面的离心。

6.根据权利要求5所述的电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，每一对正负电极的连线方向与体液进入方向夹角为70-80°。

7.根据权利要求1所述的电场捕获机理分离体液中外泌体的方法，其特征是，对于预存细胞，采用无外泌体血清对细胞进行培养；细胞培养72个小时，收集上清液；再进行分离。

8.微流控芯片，其特征是，包括内凹的分离区(2)和与分离区(2)连通的第一进料口(11)和第二进料口(12)；分离区(2)上设有若干对电极对；每对电极对的连线与液体进入方向呈锐角，角度范围为70-80°。

9.根据权利要求8所述的微流控芯片，其特征是，分离区(2)内设有弹性片，弹性片与分离区(2)底面之间形成振动腔(14)，振动腔(14)内间歇性通入气体，带动弹性片振动。

10.根据权利要求8所述的微流控芯片，其特征是，芯片还包括与分离区(2)连通的捕获区(4)，捕获区(4)内设有微电极形成捕获阵列(41)；捕获阵列(41)长基本为1500微米，每个独立捕获孔的孔径基本为300微米。