[发明专利]一种可得然多糖高效后提取方法

说明书

本发明公开了一种可得然多糖高效后提取方法。首先向产可得然多糖土壤杆菌的发酵液中加入重组微生物蛋白酶DSNJ‑rPE，20‑45℃条件下反应1‑2h；过滤收集菌体，用碱液溶解可得然多糖；然后离心或板框过滤去除菌体；上清液用酸溶液中和，析出可得然多糖可逆凝胶；胶体用去离子水洗涤2‑4次，离心或板框过滤收集胶体，斩拌机将胶体切成颗粒状；用液氮或干冰对颗粒状胶体进行速冻处理；采用沸腾干燥法，脱水干燥颗粒状胶体；最后将干燥后的胶体颗粒进一步粉碎，即得到可得然多糖精制品。本发明方法可以降低生产成本、提高多糖回收率和生产效率。同时，使用本方法提取的可得然多糖的凝胶强度，高于传统方法提取的可得然多糖凝胶强度。

技术领域

本发明属于食品工业生物技术领域，涉及一种可得然多糖高效后提取方法。

背景技术

Curdlan(中文名称：可得然多糖，又称为可得然胶)是一种以葡萄糖、蔗糖等糖类为原料由土壤杆菌(Agrobacterium sp.)等微生物发酵生产的高分子聚合物。它是一种由葡萄糖结构单元以β-1，3-糖苷键连接而成的直链多聚葡萄糖，该类聚葡萄糖具有水不溶的性质。Curdlan具有在加热条件下可快速形成凝胶的性质，经85℃以上温度条件，处理10分钟以上即可形成热不逆的凝胶，因此又被称为热凝胶。美国FDA早在1996年就批准Curdlan作为食品原辅料用于食品工业中。Curdlan是继黄原胶、结冷胶后第3个被FDA批准的微生物大分子胶。我国卫生部2006年第8号公告批准Curdlan作为一种新型的食品添加剂。GB2760-2014版规定Curdlan可以作为稳定剂、凝固剂和增稠剂，用于豆腐、面制品、肉制品、鱼糜等食品中。

Curdlan精制品，即经过分离提纯后的多糖，应用于食品加工才会发挥出具有较好的效果。因此，从发酵液中分离提纯Curdlan产品开发的重要一环，也占据总生产成本的重要部分。目前，工业化生产中可得然多糖的后提取工艺是对发酵产物碱溶液处理后，用酸液沉淀出胶体，再经乙醇脱水、干燥，最后粉碎得到Curdlan精制品。在用碱溶液溶解可得然多糖，以及酸溶液沉淀胶体环节，由于溶解或沉淀胶体不彻底，造成可得然多糖回收效率低，胶体损失的问题；脱水干燥环节使用乙醇，存在有机溶剂使用量大、成本高，且存在安全隐患的技术缺陷；若不使用酒精脱水工艺，则脱水效率低，干燥时间长。此外，制备的可得然多糖精品的凝胶强度低于发酵液粗品凝胶强度。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述问题，提供一种从微生物发酵液中高效分离提纯可得然多糖的方法。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

一种从微生物发酵液中高效分离提纯可得然多糖的方法，包括以下步骤：

(1)产可得然多糖微生物发酵结束后，向发酵液中加入重组微生物蛋白酶DSNJ-rPE，20-45℃条件下反应1-2h；

(2)微生物发酵液经过滤，弃去上清液，收集菌体；

(3)在搅拌的条件下，将收集到的沉淀物，按照1-2％(质量百分含量)的比例溶解于碱溶液；

(4)过滤去除菌体；

(5)上清液用酸溶液调节pH至中性，静置0.1-1h后获得凝胶沉淀；

(6)所得凝胶沉淀用去离子水洗涤2-4次，板框压榨脱水，得到可得然多糖化学可逆凝胶；

(7)对胶体进行切条处理；

(8)对切条后的胶体进行速冻处理，对速冻的胶体进行高速斩拌破碎处理，得到可得然胶粒；

(9)对可得然胶粒进行热风干燥，其中设备为闪蒸干燥、沸腾干燥的一种；

(10)对干燥后的可得然胶，进行粉碎处理，即到可得然多糖精制品。