[发明专利]一种用于早期贲门癌筛查ELISA试剂盒

说明书

本发明属于肿瘤医学技术领域，具体公开了一种用于早期贲门癌筛查ELISA试剂盒，该试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的肿瘤相关抗原，所述肿瘤相关抗原由EYA4、ABL1、CD38、P53、NOTCH1和DLC1组成。进一步地，所述试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液、终止液和洗涤液。本发明的ELISA试剂盒可以有效检测贲门癌，尤其是早期贲门癌，其检测灵敏度高达92.2%，特异性达到了79.6%，可用于贲门癌高发区无症状人群的大规模筛查，有利于无症状高危人群贲门癌筛查和早期发现。

技术领域

本发明涉及分子生物学和肿瘤学领域，具体涉及一种用于早期贲门癌筛查ELISA试剂盒。

背景技术

随着社会的发展及生活环境的恶化，贲门癌已经成为严重威胁到人类生命健康安全的一类恶性肿瘤。贲门癌是指贲门解剖部位发生的癌症，国内通常认为其位于食管胃交界处下方2cm内。在我国河南省林州市是中国食管癌高发地区之一，研究发现在食管癌高发地区同时存在贲门癌的高发。这一现象提示在当地的生活环境中，可能存在较强的致癌因素，这些致癌因素长期作用于上消化道黏膜，通过一些相似的机制，既导致了食管癌高发，也导致了贲门癌的高发。

传统上，“高发区、40岁以上、男性、吸烟、饮酒、家族史阳性的无症状人群”被笼统界定为“食管癌高危或高风险人群”，同时也是贲门癌早期筛查主要对象。目前,内镜检查和粘膜活检、组织病理学检查,特别是对高发区无症状居民普查和随访,仍然是发现早期贲门癌和癌前病变患者最有效的手段。但随着筛查范围扩大，这些方法暴露出一些问题，制约筛查进一步推广。如内镜筛查检出率和现患率、被检者的依从性、内镜筛查技术及组织病理诊断水平都有密切关系。现有技术中缺乏有效对高危人群预警和早期诊断的生物学指标与方法，这是造成临床上贲门癌患者就诊时间过晚,死亡率高的主要原因。

贲门癌的发生发展是一个多因素、多阶段、缓慢的发展过程,郑州大学第一附属医院王立东教授领衔的研究团队在实验室研究和随访过程中发现，经内镜活检确定为贲门癌前病变的患者，这类人群的消化道黏膜可由不典型增生(癌前病变)再进一步转化为癌；但是也有部分人群可在进展到某一阶段时停止，不再向恶性进一步发展，甚至可从癌前病变转为正常上皮组织，这一现象提示贲门癌前病变具有双向发展的特性。同时贲门癌在发病过程中也存在有癌基因的激活和抑癌基因的失活,这些分子生物学的变化均促进了癌细胞的发生和发展。

近年来的研究发现，癌细胞在形成和发展过程中会合成并释放出一组独特的自分泌性抗原,即肿瘤相关抗原(Tumor-associated Antigen,TAA)。这些TAA可在正常组织中产生，但在肿瘤细胞上表达明显增高。其中一些TAA已经应用于临床辅助诊断，如甲胎蛋白已作为肝癌诊断的一项生物学指标、癌胚抗原(CEA)已作为早期诊断消化系统肿瘤特异性标志物。然而尚无贲门癌特异相关抗原试剂盒应用于临床早期诊断。

本研究团队在前期利用全基因组关联分析、全基因组测序和全基因组外显子测序等技术建立的基因组学数据库的基础上，应用自身抗体芯片技术筛选出6种TAA，这6种TAA分别为EYA4、ABL1、CD38、P53、NOTCH1、DLC1，而且这些TAA的自身抗体均与早期贲门癌和癌前病变有关。多个肿瘤相关抗原联合检测自身抗体的变化有利于对贲门癌无症状高危人群起到一定的预警作用。然而，针对贲门癌早期诊断的多种自身抗体联合检测方法以及相应试剂盒的应用还比较少见。因此，本研究提出一种可用于早期贲门癌诊断的ELISA试剂盒，可有效检测贲门癌，尤其是检测早期贲门癌。

发明内容

针对现有技术中存在的问题和不足，本发明的目的是提供一种用于早期贲门癌早期筛查的ELISA试剂盒。

为实现发明目的，本发明采用的技术方案如下：

肿瘤相关抗原EYA4、ABL1、CD38、P53、NOTCH1和DLC1的组合在制备用于贲门癌筛查的试剂盒中的应用。