[发明专利]一种新型K血清型副溶血弧菌及其应用

权利要求书

1.一种新型K血清型副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），其特征在于，该新型K血清型副溶血弧菌的保藏编号为CGMCC No.17249，该副溶血弧菌株的K抗原决定簇的核苷酸序列如 SEQ ID No:1所示。

2.权利要求1所述的副溶血弧菌在制备新型K血清中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的新型K血清是用权利要求1所述的副溶血弧菌作为抗原，免疫动物制备的，并经过吸附作用，得到的特异性免疫血清。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的抗原为灭活抗原。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的动物为新西兰大白兔。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的新型K血清是通过与其他不同K血清型菌株的吸附作用，实现特异性。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述新型K血清的制备方法，通过以下步骤实现：

（1）抗原准备：将权利要求1的副溶血弧菌接种于3%NaCl的BHI培养基中，37℃过夜培养后，收集菌体，用生理盐水清洗后，用含0.5%甲醛的生理盐水溶液灭活菌体24h，之后将灭活的菌体溶于生理盐水中，作为抗原；

（2）收集免疫血清：

挑选健康的新西兰大白兔，将灭活的副溶血弧菌溶于0.85% NaCl中，浓度为10⁹CFU/ml，免疫4个部位，每个部位250μl，往后间隔2周加强免疫1次，免疫量与首次相同，共免疫5次后，采集全血，在37℃放置2h后，转移到4℃过夜，之后离心收集血清，该血清即为免疫血清；

（3）特异性免疫血清的制备：

将制备得到的免疫血清与权利要求1所述的副溶血弧菌进行凝集反应，凝集现象明显，与已知K血清型菌株中的K24、K59、K61血清型菌株有交叉反应，依次用0.5%甲醛灭活的浓度为10⁹CFU/ml的K24菌株、K61菌株、K59菌株4℃吸附免疫血清，之后离心得到的上清，即为本发明的新型K血清。