[发明专利]细胞膜定位罗布麻蛋白及编码序列及融合表达载体和应用

说明书

本发明公开了细胞膜定位罗布麻蛋白及编码序列及融合表达载体和应用，所述细胞膜定位罗布麻蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次鉴定得到罗布麻AvCESA1基因，并证实AvCESA1蛋白定位在质膜上，构建的融合表达载体可做为其它蛋白质膜定位的标记，以此实现的质膜定位法适用性强，容易操作，试验周期相对较短，且灵敏度高，可实现高通量的蛋白质亚细胞定位。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种细胞膜定位罗布麻蛋白及编码序列及融合表达载体和应用。

背景技术

蛋白质是一种生命大分子，结构复杂多样功能各异，在几乎所有的生命活动中起着非常重要的作用。

生命活动的基本单位是细胞。原生质体和细胞壁是构成植物细胞的两个主要部分组成。原生质体主要由细胞核和细胞质组成，是细胞壁内一切物质的总称。细胞质和细胞核中还有类型各异的的细胞器，例如高尔基体、线粒体、内质网、过氧化物酶体、核糖体、叶绿体、溶酶体以及液泡等。而亚细胞结构就是指这些包括细胞壁和质膜在内的不同细胞器。亚细胞结构中都散布各种类型的蛋白质。通常膜系统包括质膜以及各种细胞器内膜是蛋白质种类最为丰富的区域。在膜系统上分布的蛋白质主要有通道蛋白、与细胞活动相关的离子泵、载体蛋白受体蛋白以及合成酶等。

不同的亚细胞结构行使不同的功能，招募特定的蛋白质完成生命活动。同时各类亚细胞结构具有各自独特的物理空间和化学性质如pH值，能够为蛋白质参与生命体的各种活动提供稳定的环境和条件。研究蛋白质的亚细胞定位信息能够起到如下作用：（1）有利于推断蛋白质的功能。知道了蛋白质所处的亚细胞位置，便能够对蛋白质的功能、进化、与其它蛋白质之间的相互作用进行推断，初步明确蛋白质可能的功能作用；（2）了解基因功能表达的信息。生命体的核心物质是基因，基因通过一系列的生物作用生成蛋白质。生命体中基因所蕴含的遗传密码均是通过蛋白质来向生命体传达蛋白质的亚细胞定位信息可以为各种生命活动发生的机理提供理论依据。因此蛋白质亚细胞定位的研究具有重要价值和实际意义。

目前，植物蛋白质亚细胞定位方法主要包括:（1）免疫组织化学定位法；（2）共分离标记酶辅助定位法；（3）蛋白质组学定位技术；（4）生物信息学预测方法和（5）融合报告基因定位法。