[发明专利]一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法

说明书

本发明提供一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，属于生物技术领域，该方法是从凡纳滨对虾中分离和收集真菌菌株黄曲霉，然后使黄曲霉在高低温交互环境下发酵培养并产生代谢产物，所得发酵液经提取和分离纯化后，得到化合物；上述化合物为吲哚二萜类化合物，其分子式为C₃₂H₃₉NO₄。本发明提供的从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法能促进和提高菌株中生成中间体的酶活性，并引进能形成极性中心的杂原子，增加代谢产物多样性和流通效率，延长菌株生长期，提升目标物的选择性和富集倍数，减少检测痕量最低值和纯化损耗率，提高菌株利用率和目标产物得率，所得化合物可用于抗菌抑菌和抗癌领域。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法。

背景技术

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)，又称南美白对虾(White Prawn)，别名白脚虾、凡纳对虾，原产国家厄瓜多尔，原产地中南美太平洋海岸水域，生长气候带热带、亚热带、暖温带、温带海域，分布于太平洋西海岸至墨西哥湾中部，生命周期一年。黄曲霉，半知菌类，一种常见腐生真菌。多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。菌落生长较快，结构疏松，表面灰绿色，背面无色或略呈褐色。菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端产生烧瓶形或近球形顶囊，表面产生许多小梗(一般为双层)，小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子合成孢子头，可用于产生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是酿造工业中的常见菌种。

众所周知，微生物早已成为抗生素、酶抑制剂等活性物质的重要来源。微生物由于可以大规模发酵培养，无原料限制，不会破坏环境等优点已成为天然产物研究领域的热点。近年来从陆地微生物中获得新化合物的概率大幅降低，而海洋来源微生物由于其生存环境特异，除可产生与陆地相似的代谢产物之外，有时还会产生一些结构特异的新化合物，显示了巨大的开发利用前景。曲霉属真菌一直以来都是天然产物界研究的重要菌种其次级代谢产物结构新颖骨架多变，除了常规的甾体，倍半萜，蒽醌等常见结构类型以外，往往还含有：生物碱类，肽类、聚酮类、二倍半萜等多种的骨架。这些结构新颖的化合物往往还含有细胞毒，抗菌，抗病毒等多种活性，成为海洋药物先导化合物的重要来源之一，引起了业内学者的广泛关注。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法能促进和提高菌株中生成中间体的酶活性，并引进能形成极性中心的杂原子，增加代谢产物多样性和流通效率，延长菌株生长期，提升目标物的选择性和富集倍数，减少检测痕量最低值和纯化损耗率，提高菌株利用率和目标产物得率。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种从凡纳滨对虾中的黄曲霉提取化合物的方法，该方法通过使黄曲霉在高低温交互环境下发酵培养并产生代谢产物，所得发酵液经提取和分离纯化后，得到化合物；上述化合物为吲哚二萜类化合物，其分子式为C₃₂H₃₉NO₄。该方法对海洋中获取的微生物的代谢产物进行分离，并进行生理活性检测，以此获得在抗菌抑菌和抗癌领域具有应用前景的吲哚二萜类化合物，为海洋微生物资源提供更多利用途径。

作为优选，吲哚二萜类化合物包括具有结构式如下式(1)的化合物：

作为优选，黄曲霉发酵条件如下：接种量为8～12％，静态发酵，时间为25～35天。发酵过程是通过生物体的自动调节方式来完成的，反应的专一性强，因而可以得到较为单—的代谢产物，同时在微生物最适宜条件下发酵，避免了海洋环境中存在的高压、高盐、寡营养等负面影响，能提高菌株代谢产物的多样性，有利于筛选和分离。