[发明专利]含三基因的盒库、重组DNA分子及转基因棉花无效
| 申请号: | 201910386495.9 | 申请日: | 2019-05-09 |
| 公开(公告)号: | CN110484558A | 公开(公告)日: | 2019-11-22 |
| 发明(设计)人: | D·J·库雷希;H·N·库雷希 | 申请(专利权)人: | FB遗传学(私人)有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/60;C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 11038 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 郑天松<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址: | 巴基斯*** | 国省代码: | 巴基斯坦;PK |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 杀虫毒素蛋白 转基因植物 苏云金芽孢杆菌 多核苷酸序列 重组多核苷酸 侧翼 基因组序列 昆虫死亡率 内毒素基因 双子叶植物 转基因事件 插入位点 抗性发展 基因 测定法 构建体 基因组 除草 粉虱 叶蝉 昆虫 合成 检测 转化 | ||
1.具有重组多核苷酸序列的盒库,包括:
用于编码多核苷酸序列的三基因(SEQ ID NO:14),其5'末端连接与未翻译的增强子(内含子)序列连接的启动子,3'末端与NOS终止子序列连接,其中
所述三基因包含:1个Re-PAT除草基因(SEQ ID NO:11)和2个苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)δ-内毒素Cry10A(SEQ ID NO:12)和Cry1la12(SEQ ID NO:13)基因,
所述三基因经编码而在转基因植物中形成除草和杀虫毒素蛋白,导致针对杀虫毒素蛋白的抗性发展减少和对昆虫死亡率的增加的效力。
2.权利要求1的盒库,其中第一盒,第二盒和第三盒位于侧翼为左边界和右边界序列的载体的T-DNA区域内。
3.权利要求2的盒库,其中所述第一盒编码Re-PAT基因,所述第一盒具有与启动子可操作地连接的SEQ ID NO:11,在Re-PAT基因的5'末端的未翻译的增强子序列,和标记到Re-PAT基因的3'末端的NOS终止子序列。
4.权利要求2的盒库,其中所述第二盒编码杀虫Cry10A基因,所述第二盒具有与启动子可操作地连接的SEQ ID NO:12,在Cry10A基因的5'末端的未翻译的增强子序列,和标记到Cry10A基因的3'末端的NOS终止子序列。
5.权利要求2的盒库,其中所述第三盒编码杀虫Cry1la12基因,所述第三盒具有与启动子可操作连接的SEQ ID NO:13,在Cry1la12基因的5'末端的未翻译增强子序列,和标记到Cry1la12基因的3'末端的NOS终止子序列。
6.前述权利要求的盒库,其中转基因植物中每个基因,Re-PAT,Cry10A和Cry1la12基因的5'末端与未翻译的增强子序列(内含子)连接,所述增强子序列包含SEQ ID NO:14的从第685个核苷酸到第712个核苷酸的28个核苷酸。
7.前述权利要求的盒库,其中所述启动子是花椰菜花叶病毒(CaMV35S)启动子。
8.权利要求1的盒库,其中具有SEQ ID NO:14的盒库存在于转基因植物、种子、细胞或转基因植物的一部分中。
9.权利要求1的盒库,其中所述转基因植物是选自甘蔗、小麦和玉米植物的单子叶植物。
10.权利要求1的盒库,其中所述转基因植物是选自棉花、马铃薯和番茄植物的双子叶植物。
11.权利要求10的盒库,其中所述双子叶植物是棉花植物。
12.权利要求1的盒库,其中所述盒库位于SEQ ID NO:19,其具有用于识别的SEQ IDNO:20的正向引物和SEQ ID NO:21的反向引物。
13.重组DNA分子,其包含选自SEQ ID NO:1~14,SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:20和SEQID NO:21的多核苷酸序列及其互补物。
14.权利要求13的重组DNA分子,其中所述包含SEQ ID NO:1~14,SEQ ID NO:19,SEQID NO:20和SEQ ID NO:21及其互补物的DNA分子位于转基因棉花植物、植物细胞、种子或植物部分中。
15.权利要求13的重组DNA分子,其中所述DNA分子包含核苷酸SEQ ID NO:19在转基因棉花植物、植物细胞、种子或植物部分中。
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