[发明专利]检测胆红素的纸芯片及一种快速检测胆红素含量的方法

说明书

本发明提供了一种快速检测胆红素含量的方法，包括，在剧烈搅拌下将HAuCI₄溶液加入到人血清白蛋白溶液中，之后加入NaOH溶液，剧烈搅拌下反应12h得AuNCs溶液；制备胆红素储备液；将AuNCs均匀滴入滤纸上，然后将不同浓度的胆红素滴加到滤纸上，避光阴干；通过胆红素浓度与相对灰度值的变化值呈线性关系计算胆红素的浓度。本发明还提供了用于快速检测胆红素含量的纸芯片。本发明利用HSA‑AuNCs修饰的纸芯片来检测胆红素的含量，在制备HSA‑AuNCs的过程中采用NaOH作为稳定剂，可防止形成不规则的、不发荧光的大颗粒；同时由于在滤纸表面修饰上了HSA‑AuNCs，其能够与胆红素结合，从而诱导AuNCs聚集导致荧光猝灭，通过纸芯片上颜色变化的深浅来检测胆红素的含量。

技术领域

本发明涉及化学检测，具体涉及一种可快速简便检测溶液中胆红素浓度的纸芯片及一种快速检测胆红素含量的方法。

背景技术

胆红素是一种致病物质，是血红蛋白中常见代谢物之一，可对大脑和神经系统引起不可逆的损害。胆红素代谢紊乱，特别是新生儿常见的疾病，可能导致黄疽，皮肤和其他组织呈黄色。游离胆红素是胆红素组织和吸收毒性的主要决定因素，在黄疸新生儿闹病变的发病机制中起着至关重要的作用。因此血清中游离胆红素浓度是评估新生儿黄疸风险的参数。通常情况下，游离胆红素与白蛋白结合后以化合物的形式被运输到肝脏，再由胆汁排出，因此，血液中游离胆红素的浓度通常保持在恒定的水平上。常规的游离胆红素检测方法有：重氮盐法、过氧化物酶和胆红素氧化酶法、电化学传感器和一些分离的方法。

但这些方法仍存在局限性。灵敏度和选择性是检测方法的重要指标，传统的重氮盐法依赖于环境PH导致其准确度不高，且受灵敏度限制不便于实际样的检测；后期改良的检测方法如过氧化物酶和胆红素酶氧化酶的氧化法等，有效解决了灵敏度和选择性问题，但是这些方法需要复杂昂贵的检测仪器，因为无法广泛使用。此外，以酶为基础的分析方法和生物传感器装置，稳定性低，成本高，对物理和化学环境的变化非常敏感，例如温度和PH值抑制它们周围的化学物质。

近年来荧光法由于检测设备简单，检测结果直观受到青睐，它是今年发展起来的恶意向简便、快捷、林敏的分析技术，其分析测定在一台普通的荧光分光光度计上就可以进行。荧光检测具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。然而，含重金属的量子点存在一定的毒性、标记复杂、光稳定差、荧光轻度弱等缺点，其应用受到限制。AuNCs由于其具有特有的尺寸效应、Stokes位移较大、合成方法简便、生物兼容性好、毒性低特点，在金属离子检测、生物分子检测方面得到了广泛的应用。大多数情况下基于胆红素与HSA发生强相互作用，从而诱导金纳米簇的聚集，引起金纳米簇颜色、大小性状以及紫外吸收的变化，从而进行目标物检测，简单快速，灵敏直观。但金纳米簇本身的稳定性极易受pH、离子强度等条件的影响，因此在实际样品的检测中仍有一定困难。

发明内容

为解决现有技术存在的不足，本发明的发明人通过大量实验研究研发了一种快速简便的胆红素含量快速检测方法，并设计制作了一种具有高灵敏度、高选择性可用于检测胆红素浓度的纸芯片。

具体而言，本发明提供了一种胆红素含量快速检测方法，包括以下步骤：

S1：在37℃剧烈搅拌下将HAuCI₄溶液加入到人血清白蛋白溶液中，之后加入NaOH溶液，37℃剧烈搅拌下反应12h得AuNCs溶液；制备胆红素储备液；

S2：将AuNCs均匀滴入滤纸上，然后将不同浓度的胆红素滴加到滤纸上，避光阴干；

S3：通过胆红素浓度与相对灰度值的变化值呈线性关系计算胆红素的浓度，线性关系为y＝1.2122x+18.128，其中，x为胆红素浓度，y为相对灰度值。

进一步的，所述步骤S1具体包括：在37℃剧烈搅拌下将10mM的HAuCI₄溶液加入到50mg/mL的人血清白蛋白溶液中，2min后，加入1M NaOH溶液，使其在37℃剧烈搅拌下反应12h。