[发明专利]HPLC法测定金银清瘟合剂中有效成分含量的方法

说明书

本发明涉及一种HPLC法测定金银清瘟合剂中有效成分含量的方法，即测量金银清瘟合剂中绿原酸的含量。采用水煎提取和蒸馏浓缩法提取处方中各药材有效成分制成合剂，采用HPLC法测定，Diamonsil G8ODS色谱柱(4.6nm×200mm，5μm)；以50%甲醇‑0.4%磷酸水为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃，检测波长为327nm，进样量10μl。绿原酸保留时间为18.126min，线性范围为0.991～9.93（r=0.9999），平均加样回收率为99.16%，检测限为0.1μg/ml。金银清瘟合剂制备工艺稳定，HPLC法测定绿原酸含量高效、准确、稳定，质量标准可行。

技术领域

本发明涉及一种HPLC法测定金银清瘟合剂中有效成分含量的方法，即测量金银清瘟合剂中绿原酸的含量。

背景技术

金银清瘟合剂（原金银合剂）为某医院多年自制合剂，在医院内应用多年，特别是手足口病流行暴发的前几年，在临床使用西药无很好疗效时，该制剂在治疗时发挥了积极作用，受到医生和患者的一致好评。该制剂含有金银花、连翘、金银花、连翘、广藿香、滑石粉、茵陈、防风、白芷、芦根、葛根、板蓝根、拳参、黄芪、白术、甘草共计14味中药，由于该制剂中药品种类多达14种，存在一定的相互干扰，在质量控制特别是主要成分含量测定上未有很好方法。

目前尚未发现有关金银清瘟合剂有效成分含量测定的方法。

发明内容

本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种方法简单、抗干扰、测量结果稳定准确的HPLC法测定金银清瘟合剂中有效成分含量的方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：本发明的HPLC法测定金银清瘟合剂中有效成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）溶液的制备

对照品溶液：精密称取干燥至恒重的绿原酸对照品适量，加50%甲醇使其溶解，制成含绿原酸0.1mg/ml的对照品溶液；

供试品溶液：精密量取金银清瘟合剂10ml,置25ml容量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，用滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液即为供试品溶液；

（2）对照品溶液的检测

分别精密量取一定量的对照品溶液置于容量瓶中加50%甲醇定容，然后取10μl进样，采用高效液相色谱法测定，得到峰面积并记录；以峰面积为纵坐标Y，以进样品的浓度为横坐标X，进行线性分析，得到回归方程；

（3）供试品溶液的检测

取供试品溶液进行高效液相色谱法检测，得到其峰面积，将其峰面积作为Y值代入步骤（2）的回归方程，根据Y值计算X，即可得到金银清瘟合剂中绿原酸的含量。

作为优选方案,回归方程为Y=1563200.216X-1638.212（r=0.9999）,绿原酸在0.991～9.93mg/ml浓度范围内线性良好。

作为优选方案，所述滤膜采用孔径大小为0.5μm的微孔滤膜。

作为优选方案，对照品溶液检测中量取的对照品溶液分别为1ml、2ml、4ml、6ml和8ml，容量瓶为10ml。

作为优选方案，色谱条件：采用Diamonsil G8 ODS色谱柱(4.6nm×200mm，5μm)；流动相为50%甲醇-0.4%磷酸水溶液，流速为1.0ml/min，检测波长为327nm，柱温为30℃，进样量为10μl。

本发明的有益效果：1.本发明依据《中华人民共和国药典》2015年版四部通则首次建立了HPLC法测定金银清瘟合剂中君药金银花主要有效成分绿原酸含量的方法。2.本发明的测定方法简单、高效稳定、测定结果准确且具有一定的抗干扰性。3.本发明还有利于金银清瘟合剂的进一步研究与开发。

附图说明