[发明专利]一种快速检测纳米颗粒表面配体含量的方法

说明书

本发明涉及一种快速检测纳米颗粒表面配体含量的方法，该方法为：设置不含样品的对照组和含待检纳米颗粒的检测组，进行电泳滴定，测定相同时间内对照组和检测组的界面迁移距离，根据界面迁移距离的差值计算检测组的纳米颗粒表面配体含量。与现有技术相比，本发明具有操作流程简便、耗时短、具有可视化且不需要依赖昂贵仪器的优点。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，具体涉及一种快速检测纳米颗粒表面配体含量的方法。

背景技术

纳米颗粒(NPs)表面具有很高的比表面积，并能与不同的配体结合。这些配体的存在能够改变NPs在不同溶液中的溶解度、特异性、对不同物质的吸附能力、表面电荷数、电化学活性等，尤其是NPs通过结合不同的大分子能够实现可调的生物活性功能。对吸附在NPs上的配体进行定量分析，可以帮助我们了解配体交换反应，在许多应用中，如化学检测，结合生物靶标和载流子通常都是必要的。

NPs的配体含量检测仍然存在很大的挑战，通常有元素分析(J.Aldana,Y.A.Wang,X.Peng,JACS.2001,123,8844-8850.,J.Aldana,N.Lavelle,Y.Wang,X.Peng,JACS.2005；127,2496-2504.)和光学方法(G.Kalyuzhny,R.W.Murray,J.PHYS.CHEM.B.2005,109,7012-7021.,K.E.Knowles,D.B.Tice,E.A.McArthur,G.C.Solomon,E.A Weiss.JACS.2009；132,1041-1050.,A.M.Munro,I.Jen-La Plante,M.S.Ng,D.S.Ginger.J.PHYS.CHEM.C.2007；111,6220-6227.)等方法用于具有电化学活性或核磁共振信号的配体计数，但这些方法存在需要使用复杂的内标，样品预处理费时和依赖昂贵仪器等问题。

与蛋白质类似的羧酸和胺基是包覆在NPs表面配体的基本基团，酸碱中和反应是一种定量快速的化学反应，能正确地快速检测含有酸性或碱性基团的NPs的配体覆盖率。为了快速定量乳制品中蛋白质含量，基于移动反应界面(MRB)发展了电泳滴定技术和装置(H.Y.Wang,C.Y.Guo,C.G.Guo,L.Y.Fan,L.Zhang,C.X.Cao,Anal.Chim.Acta,2013,774,92-99；H.Y.Wang,J.Yang,J.Y.Dong,W.Zhang,L.Y.Fan,W.B.Zhang,C.X.Cao,ChineseJ.Anal.Chem.,2012,40,968-972等)，申请了蛋白含量电泳滴定检测相关专利(用于测定酸碱浓度的电迁移酸碱滴定装置，中国发明专利，2011年，申请号：CN201010596012.7；一种用于测定蛋白质总浓度的可视化生物传感器装置，中国发明专利，2012年，申请号：CN201210142985.2；基于移动反应界面电泳的高通量蛋白质滴定方法，中国发明专利，2013年，申请号：CN201310089084.6；防渗漏电泳滴定电极液流动排气装置及其使用方法，中国发明专利，2014年，申请号：CN201410478864.4等)。此外，为了进一步减少检测样品消耗、缩短检测时间发展了蛋白电泳芯片滴定技术(H.Y.Wang,Y.T.Shi,J.Yan,J.Y.Dong,S.Li,H.Xiao,H.Y.Xie,L.Y.Fan,C.X.Cao,Anal.Chem.,2014,86,2888-2894；L.X.Zhang,Y.R.Cao,H.Xiao,X.P.Liu,S.R.Liu,Q.H.Meng,L.Y.Fan,C.X.Cao,Biosens.Bioelectron.,2016,77,284-291)，并申请了芯片电泳滴定相关专利(一种定性、定量一体化检测乳品掺次的方法，中国发明专利，2015年，申请号：CN201510542254.0；定量测定乳品掺次程度的电泳滴定方法，中国发明专利，2015年，申请号：CN201510140100.9)。虽然电泳滴定技术在蛋白含量检测方面已经有很好的应用，但是在纳米颗粒表面配体含量测定方面的应用还是空白，尤其是不依赖内标实现对配体含量的绝对定量检测和分析仍有困难。

发明内容