[发明专利]深海管状蠕虫AprA基因及其表达方法

说明书

深海管状蠕虫AprA基因及其表达方法，涉及深海管状蠕虫AprA基因。深海管状蠕虫AprA基因的编码深海管状蠕虫自分泌增殖抑制蛋白的核苷酸序列。深海管状蠕虫AprA基因的蛋白序列为阅读框编码的蛋白56kDa。深海管状蠕虫AprA基因的分子类型为DNA，序列特征：长度为1491bp，类型为核酸，链性为双链，拓扑结构为线性，其核酸序列记为SEQ ID No.1。所述重组表达的深海管状蠕虫AprA的分子类型为蛋白质，序列特征：长度为476aa，类型为氨基酸，序列记为SEQ ID No.3。表达方法：构建深海管状蠕虫AprA基因的重组表达载体；测定深海管状蠕虫AprA基因的重组表达与蛋白活性。

技术领域

本发明涉及深海管状蠕虫AprA基因，尤其是涉及来自深海冷泉的深海管状蠕虫AprA(Lamellibrachia luymesi Autocrine proliferation repressor protein A)基因及其表达方法。

背景技术

本发明所涉及的管状蠕虫Lamellibrachia luymesi采自深海冷泉。深海冷泉是比较典型的极端环境，属于化能生态系统，与一般的依赖光合作用获取能量的生态系统不同，其环境严酷，富含甲烷和重金属等有毒有害物质^[1]。冷泉生物系统是指示海底冷泉非常直接的标志，甲烷氧化菌和硫酸盐还原菌参与到冷泉流体中的甲烷与硫酸根离子的缺氧甲烷氧化反应中，为化能自养生物提供了碳源和能量，成为冷泉生态系统的初级生产者。在其基础上又发育着菌席和深海双壳类(贻贝类和蛤类)及蠕虫(管状群蠕虫和冰蠕虫)多毛类动物以及海星、海胆、海虾等一级消费者，其中管状蠕虫只出现在冷泉流速较低的环境。

很多组织或器官具备能生长到特定大小的固有性质^[2]，人们便认为在一些组织在特定阶段有很多分泌因子有抑制细胞增殖的功能，这些分泌因子的鉴定以及它们行使功能的方式可以有助于设计作用于抑制细胞增殖途径的药物，而且为模仿癌症肿瘤休眠方式提供了可能。起初人们发现许多分泌因子的功能在于调节特定组织的大小，但是很多未被鉴定，由于这些因子拥有抑制分泌细胞增殖或生长的能力，所以被称为抑素(chalones)^[3]。自分泌增殖抑制蛋白Autocrine proliferation repressor protein A(AprA)就是一种抑素，抑素(chalones)是细胞产生的一类分泌因子，可以在不影响细胞生存的情况下抑制细胞的增殖^[4]，且很多证据表明，抑素可能通过G蛋白介导的信号转导途径行使功能^[5]。关于AprA研究较多的是Dictyostelium，其分泌的AprA为60kDa，是约150kDa AprA factor复合物的一部分，该复合物能负向调节Dictyostelium分泌细胞的增殖，AprA能减缓增殖但不能停止增殖，并且能够减少多核细胞的数量并增加孢子的产生^[6]，缺乏AprA的细胞表现出反常的快速增殖，添加重组的AprA可以缓解AprA-null突变株快速增殖的现象^[7]。AprA的抑制增殖作用和化学排斥的激活需要G蛋白的协助，表明AprA可能是GPCR的一个配体^[8]。

发明内容

本发明的第一个目的是提供深海管状蠕虫AprA基因的核苷酸序列。

本发明的第二个目的是提供深海管状蠕虫AprA基因的蛋白序列。

本发明的第三个目的是提供深海管状蠕虫AprA基因的表达方法。

所述深海管状蠕虫AprA(Autocrine proliferation repressor protein A)基因的编码深海管状蠕虫自分泌增殖抑制蛋白的核苷酸序列，记为AprA。

所述深海管状蠕虫AprA基因的蛋白序列为阅读框编码的蛋白56kDa，该蛋白能抑制细胞的生长。