[发明专利]百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法

权利要求书

1.一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)一个选择外植体的步骤：选取百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的根茎侧基发出的新芽，切割带有部分根茎组织的新芽，切割后用蘸取了体积百分比浓度为75％酒精的棉球擦拭芽组织，剥离芽外围叶，保留4～6片包裹叶，使得芽的长度在0.6～1.0cm范围内，以备消毒；

2)一个对外植体进行消毒处理的步骤：采用体积百分比浓度为1％的洗洁精进行表面清洗10～15min，然后用自来水冲洗1～2h，移至超净工作台；先用体积百分比浓度为75％的酒精冲涮30s，无菌水冲洗至少2次，然后用体积百分比浓度为0.1％的氯化汞溶液摇动消毒6～8min，无菌水冲洗至少2次，剥去外层包裹叶、露出心芽；

3)一个启动培养的步骤：采用灭菌刀片薄层切去芽基部受消毒剂杀伤致死的根茎组织，将芽接入诱导培养基MS+6-BA 4.0～8.0mg/L+NAA 0.1mg/L上培养，在所述的培养基上培养至母芽侧基出现1～2个新芽；

4)一个增殖培养的步骤：将侧基芽及母芽沿中心切割一分为二，转入增殖培养基MS+6-BA2.0～6.0mg/L+NAA 0.1mg/L上培养，在该培养基上培养至芽基陆续增生6～10个丛生状不定芽，1月后切割不定芽继续转接至芽增殖培养基MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.1mg/L进行继代增殖培养，如此反复转接实现增殖；

5)一个壮苗培养的步骤：切割增殖丛生芽至壮苗培养基MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05～0.1mg/L中培养，在该培养基上培养至基部紧密丛生的芽成为独立的芽；

6)一个生根培养的步骤：在壮苗培养基上培养后，分别将单个芽切割转入生根培养基培养，所述的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L或1/2MS+IBA 0.2mg/L或MS+NAA 0.2mg/L，在该培养基上接种培养10天后芽基部开始出现根凸起，至50～60天后生根数4～10、最大根长40～60mm，苗高长至50～70mm的生根苗时进行移栽。

2.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：还包括一个炼苗与移栽的步骤：于春、秋季外界气温10～20℃时，进行组培生根苗移栽。

3.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：在步骤2)中，剥去外层包裹叶、露出心芽后再加入0.05％氯化汞溶液浸泡1min，无菌水冲洗至少2次。

4.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤3)的诱导培养基为MS+6-BA 8.0mg/L+NAA 0.1mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤4)的增殖培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.1mg/L。

6.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤5)的的壮苗培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L。

7.根据权利要求1所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：步骤6)的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L。

8.根据权利要求2所述的一种百子莲矮生重瓣品种‘钻石重’的种苗快速繁育方法，其特征在于：移栽前两天先打开瓶盖，组培瓶内加入少量蒸馏水薄层湿润培养基，瓶盖完全打开降低空气湿度，叶表面喷雾化水以使瓶苗适应，2～4天后取出组培苗清洗基部培养基移栽至栽培基质中，所述的栽培基质由草炭和珍珠岩按照体积比3:1混合；栽后喷施水分使基质足够吸水保湿，新移栽小苗置于透明塑料薄膜下以保湿，每日中午掀开塑料薄膜稍透气0.5～1h，其余时间遮盖，视基质干燥情况适当喷雾补水，2周后打开塑料薄膜，使适应自然光照与空气湿度，炼苗完成。