[发明专利]一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂及其制备和应用在审
| 申请号： | 201910321000.4 | 申请日： | 2019-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN110029102A | 公开（公告）日： | 2019-07-19 |
| 发明（设计）人： | 鞠巍;沈欢;徐根明;潘艺;赵谦 | 申请（专利权）人： | 湖南大地同年生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 长沙睿翔专利代理事务所(普通合伙) 43237 | 代理人： | 周松华;孙建霞 |
| 地址： | 410205 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脱落细胞 粪便 制备和应用 核酸保存 核酸 常温条件 粪便检测 粪便样本 核酸检测 细菌核酸 有效抑制 释放 保存液 上清液 降解 细菌 衔接 检测 | ||
1.一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂，其特征在于包括缓冲试剂、金属离子螯合剂、抑菌剂、离子型去垢剂和表面活性剂；其中所述的缓冲试剂是pH 7～10的50mM～1M Tris-HCl或磷酸盐缓冲液；所述的金属离子螯合剂是1mM～100mM乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性盐中的至少一种；所述的抑菌剂是二醇类、苯甲醇、苯乙醇、ProClinTM 300和NaCl中的至少一种；所述的离子型去垢剂选自浓度0.1％～10％的十二烷基硫酸钠、十二烷基璜酸钠、十二烷基硫酸锂、癸基硫酸钠、辛基硫酸钠、月桂醇聚氧乙烯醚硫酸酯钠、尿素等中的至少一种；所述的表面活性剂为非离子型去污剂，包括浓度0.5％～10％Brij-35、Tween-20、Tween-80、NP40和Triton-100中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂，其特征在于所述的缓冲试剂pH值为8～9，浓度范围为300mM～500mM。
3.根据权利要求1所述的一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂，其特征在于所述的金属离子螯合剂浓度为30mM～60mM。
4.根据权利要求1所述的一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂，其特征在于所述的抑菌剂选择ProClinTM 300和NaCl中的至少一种，抑菌剂ProClinTM 300的浓度为0.03％～0.1％。，NaCl的浓度为50mM～1M。
5.根据权利要求1所述的一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂，其特征在于所述的离子型去垢剂选择十二烷基硫酸钠和十二烷基璜酸钠的至少一种，浓度为1％～5％。
6.根据权利要求1所述的一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂，其特征在于所述的非离子型表面活性剂选择NP40和Triton-100中的至少一种，浓度为1％～3％。
7.如权利要求1所述的一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：
(1)根据要配制的保存液体积，在无菌去离子水中加入缓冲试剂、金属离子螯合剂、抑菌剂、离子型去垢剂和非离子型表面活性剂；
(2)用盐酸或NaOH将溶液pH值调至8～9；
(3)用无菌去离子水将溶液保存液调至所要求的体积，混匀，即得所需保存液，保存液常温保存。
8.一种粪便脱落细胞及其核酸保存试剂在保存粪便脱落细胞及其核酸上的应用。
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