[发明专利]一种活性丝素多孔材料或活性丝素膜及其制备方法

权利要求书

1.一种活性丝素多孔材料或活性丝素膜的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)制备脱胶后的家蚕丝素纤维：将家蚕蚕丝或茧壳放入碳酸钠水溶液中加温处理，清洗，拉松，干燥，得到脱胶后的家蚕丝素纤维；

(2)制备家蚕丝素溶解液：将所述脱胶后的家蚕丝素纤维完全溶解于溴化锂水溶液中，获得丝素溶解液；

(3)制备纯化后的家蚕丝素蛋白水溶液：将所述丝素溶解液灌注于透析袋内，然后置于盛有去离子水的容器内，每隔2小时用新的去离子水或者纯水更换容器内的液体，持续透析3天后浓缩，得到纯化后的家蚕丝素蛋白水溶液；

(4)制备改性丝素蛋白的水溶液：向所述纯化后的家蚕丝素蛋白水溶液中加入己二酸，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，再加入2-吗啉乙磺酸，冰浴搅拌10～30分钟后，置于4℃下反应过夜，将反应后的混合溶液装入透析袋用去离子水透析12～48小时，然后蒸发浓缩，得到改性丝素蛋白的水溶液，其中，纯化后的家蚕丝素蛋白与己二酸的质量比为100:1～20，所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的加入量是纯化后的家蚕丝素蛋白质量的30～50％，所述N-羟基琥珀酰亚胺的加入量是纯化后的家蚕丝素蛋白质量的15～25％，所述2-吗啉乙磺酸的终浓度为0.05M，所述改性丝素蛋白的水溶液在蒸发浓缩后至质量分数为5～15％；

(5)制备活性丝素多孔材料和活性丝素膜：向所述改性丝素蛋白的水溶液中加入终浓度为10～1000nM的CGRP的水溶液，搅拌均匀获得混合液，将所述混合液冷冻干燥或风干，得到活性丝素多孔材料或活性丝素膜，其中，在所述冷冻干燥之前先将混合液于-80℃～-20℃预冷冻2～24小时，所述风干具体为将所述混合液倒入一平整的聚苯乙烯平皿中在小于25℃的温度下风干。

2.根据权利要求1所述的活性丝素多孔材料或活性丝素膜的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述将家蚕蚕丝或茧壳放入碳酸钠水溶液中加温处理是指将家蚕蚕丝或茧壳按1g:50mL的浴比放入质量浓度为0.2～0.8％％的碳酸钠或0.5～1.0％碳酸氢钠的水溶液中在95～100℃的温度条件下处理2～3次，每次处理30分钟，所述干燥是指在60℃烘箱内干燥。

3.根据权利要求1所述的活性丝素多孔材料或活性丝素膜的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述将所述脱胶后的家蚕丝素纤维完全溶解于溴化锂水溶液中是指称取所述脱胶后的家蚕丝素纤维，按1g:10mL的浴比溶解于9.3M的溴化锂水溶液中，在温度为65℃的条件下处理直至丝素纤维完全溶解。

4.根据权利要求1所述的活性丝素多孔材料或活性丝素膜的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述透析袋为半透膜，截留分子量为10～14kDa，所述浓缩具体为采用旋转蒸发器浓缩，使调整透析后的家蚕丝素蛋白水溶液的质量分数为5～15％。