[发明专利]稳定、特异性强的结合珠蛋白检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种稳定、特异性强的结合珠蛋白检测试剂盒，涉及生物技术领域。所述检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1的成分如下：缓冲液10～100mmol/L，表面活性剂1：5～10ml/L，无机盐离子5～10g/L，加速剂20～30g/L，表面活性剂2：2～20g/L，异噻唑啉酮1～10g/L，防腐剂0.5～1g/L；所述试剂R2的成分和含量如下：缓冲液10～100mmol/L，羊抗人结合珠蛋白抗体5～10mg/L，牛血清蛋白5～10g/L，聚醚L‑65：0.5～1g/L，D‑海藻糖10～20g/L，防腐剂0.5～1g/L。本发明抗干扰能力强、稳定性好和特异性强。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种稳定、特异性强的结合珠蛋白检测试剂盒。

背景技术

结合珠蛋白(Haptoglobin，Hp)又称触珠蛋白，是一种分子量为85000的酸性糖蛋白，广泛存在于人类和许多哺乳动物的血清及其他体液中，在CAM电泳及琼脂糖凝胶电泳中，结合珠蛋白位于α2区带，分子中有两对肽链(α链与β链)共同形成α2β2的四聚体。结合珠蛋白主要在肝脏合成，其降解也在肝脏，半衰期约为3.5～4天。

Hp与CRP同属急性期反应蛋白，其主要功能是通过与游离血红蛋白(Hb)结合形成Hp-Hb复合物，并很快被单核-巨噬细胞系统介导的清道夫受体CD163清除掉，防止Hb对组织的氧化损伤，阻止Hb从肾小球滤过，避免Hb对肾小管的损害。Hp具有抗氧化活性、抗炎、抗菌、促进血管生成等作用。

血清中的正常结合珠蛋白含量在0.5～2.0g/L，如果结合珠蛋白水平发生改变，就会标志着疾病的发生或者对抗疾病的发展。增高见于妊娠、慢性感染等；减低见于各种溶血、肝病或巨幼细胞贫血等。蛋白组学已经成为诊断糖尿病肾病的新工具。其中结合珠蛋白与糖尿病肾病的发生及发展密切相关，因此其将成为预测糖尿病早期肾功能下降的新的生物标记物。

目前临床检测结合珠蛋白的方法是血红蛋白结合法和免疫比浊法。其中，血红蛋白结合法根据结合珠蛋白和血红蛋白等摩尔结合的特点，采用火箭电泳法检测，即向被测血清中加入过量的血红蛋白，血清中的结合珠蛋白与血红蛋白结合生成复合物，通过火箭电泳后分离出血红蛋白和复合物两条区带，通过一系列操作，计算HP的浓度，该方法操作步骤复杂且繁琐，显示结果速度慢、误差大，并且显示的结果是血红蛋白的含量，只间接反映结合珠蛋白的含量，在临床上未能广泛开展。免疫比浊法相对于血红蛋白结合法具有操作简单、检测结果误差小的优势，但是现有的免疫比浊法结合珠蛋白检测试剂盒的抗干扰能力、稳定性和特异性较差，还需进一步改进。

发明内容

本发明提供一种抗干扰能力强、稳定性好和特异性强的稳定、特异性强的结合珠蛋白检测试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明提供技术方案如下：

本发明提供一种稳定、特异性强的结合珠蛋白检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，其中：

所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

进一步的，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

进一步的，所述缓冲液为PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、Tris缓冲液中的一种或多种组合，所述试剂R1和试剂R2中的缓冲液的温度为25℃，PH值为7.4。

进一步的，所述表面活性剂1为Triton X-100，所述表面活性剂2为聚氧乙烯月桂醚。

进一步的，所述无机盐离子为氯化钠、氯化钾、氯化镁中的一种或多种组合。