[发明专利]一种羧甲司坦含量测定方法

说明书

本发明涉及体内药物的测定方法，特别涉及一种羧甲司坦含量测定方法，包括以下步骤：（1）标准曲线溶液的制备；（2）待测血浆样本的制备；（3）标准曲线的绘制；（4）待测血浆样本检测。本发明的检测方法可以对人体血浆样本中羧甲司坦含量进行准确定量分析，灵敏度高，检测限低，下限可达到30ng/mL；本发明的检测方法可高选择性的检测待测物产生的特定离子对，检测不受血浆中其它物质的干扰；本发明的检测方法步骤简单，快速准确，从样本接收到得到数据仅需30分钟。

技术领域

本发明涉及体内药物的测定方法，特别涉及一种羧甲司坦含量测定方法。

背景技术

羧甲司坦（Carbocisteine）为黏液稀化剂，作用与溴己新相似，主要在细胞水平影响支气管腺体的分泌，可使黏液中黏蛋白的双硫键断裂，使低黏度的涎黏蛋白分泌增加，而高黏度的岩藻黏蛋白产生减少，从而使痰液的黏滞性降低，有利于痰液排出。口服起效快，服后4小时即可见明显疗效。广泛分布至肺组织中，最后以原型和代谢产物的形式经尿液排泄。

研究表明，羧甲司坦在不同个体相同剂量条件下，药物的吸收与代谢会有明显的差别，直接影响治疗效果。因此，通过测定人血浆中不同时间点羧甲司坦的含量，可以判断个体药物吸收情况，从而可以差别化指导用药，达到理想的治疗效果。

目前，已报道的羧甲司坦检测方法多是测定药物本身的含量，多采用液相色谱、紫外光谱进行不同制剂含量测定。方法灵敏度低，无法满足人体血浆中低含量，复杂基质条件下的药物浓度检测。

发明内容

本发明克服了现有技术中的不足，提供了一种采用微生物和化学还原相结合的处理含氮废水的方法，以解决上述问题。

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：一种羧甲司坦含量测定方法，包括以下步骤：一种羧甲司坦含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）标准曲线溶液的制备：将羧甲司坦溶解后采用50%甲醇水溶液进行逐级稀释，稀释范围为600 ng/mL~80000 ng/mL，分别取稀释后的各级羧甲司坦溶液，加入空白血浆和同位素内标溶液，混合均匀，以14000 r/min离心15 min，取上清液得羧甲司坦标准曲线溶液；

（2）待测血浆样本的制备：取待测血浆样本50μL，加入250 μL含同位素内标的沉淀剂甲醇，涡旋1 min后，在4℃的离心机中，以14000 r/min离心15 min，取上清液在2~8℃冷藏备用；

（3）标准曲线的绘制：将步骤（1）制备的标准曲线溶液进行液相质谱检测，以羧甲司坦标准曲线溶液校正浓度理论值为横坐标，以羧甲司坦与同位素内标的面积比值为纵坐标进行线性回归分析，线性系数不小于0.99；

（4）待测血浆样本检测：将步骤（2）制备的待测血浆样本进行液相质谱检测，检测结果带入步骤（3）得到的标准曲线中，计算得到待测血浆样本中羧甲司坦的含量。

作为优选方案，所述标准曲线溶液与待测血浆样本中的内标液浓度相同，均为100ng/mL。

作为优选方案，所述步骤（1）和步骤（2）中，所述同位素内标液为羧甲司坦各构型对应的氘代物或¹³C₃代物或¹⁵N代物中的一种。

作为优选方案，所述同位素内标液为羧甲司坦¹³C₃。

作为优选方案，所述步骤（1）中，将羧甲司坦分别稀释为80000ng/mL、64000ng/mL、20000ng/mL、12000ng/mL、6000ng/mL、2000ng/mL、1200ng/mL、600ng/mL。