[发明专利]飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂7及其编码基因与应用

说明书

本发明公开了飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂7及其编码基因与应用。本发明通过基因克隆技术从飞蝗中克隆了飞蝗LmSerpin7基因，并合成了用于干扰飞蝗LmSerpin7基因的dsRNA，且运用注射法将dsRNA导入飞蝗对飞蝗LmSerpin7基因进行RNAi，结果发现该基因能够调控飞蝗卵滞育，本发明为更深入理解飞蝗滞育机制、提供新的生物农药靶标位点提供理论基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及飞蝗丝氨酸蛋白酶抑制剂7(Serpin7)及其编码基因与应用。

背景技术

飞蝗是农牧业重大害虫，以胚胎滞育越冬，属兼性滞育昆虫，滞育诱导外界条件有温度、光周期等。目前已经报道的滞育调控机制有分子调控、激素调控，生物钟调控，以及能量调控，比较公认的是激素调控方式。

丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpins)蛋白家族是一个成员众多、分布广泛的蛋白酶抑制剂家族。典型的serpin通常具有350～400个氨基酸，当serpin与底物结合后，发生不可逆抑制。研究表明serpins在血液凝固、纤维蛋白溶解、补体激活、炎症反应和细胞外基质重塑中起到重要作用。除此之外，丝氨酸蛋白酶抑制剂还在机体的组织合成和胚胎发育中发挥着重要的作用。在果蝇的早期胚胎发育中，Spn27A通过抑制toll信号通路调控了果蝇胚胎背腹轴的形成；Spn88Ea在果蝇翅膀发育中起到重要作用；serpin蛋白酶的平衡在线虫的后胚胎发育中起到关键作用。迄今为止，serpin对滞育影响的研究鲜有报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是如何防治害虫。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了一种丝氨酸蛋白酶抑制剂。

本发明提供的丝氨酸蛋白酶抑制剂来源于飞蝗(Locusta migratoria)，其名称为LmSerpin7，是如下a)或b)或c)或d)的蛋白质：

a)氨基酸序列是序列2所示的蛋白质；

b)在序列2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；

c)将序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；

d)与序列2所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。

为了使a)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列2所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1、标签的序列

上述c)中的蛋白质LmSerpin7，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述c)中的蛋白质LmSerpin7可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述c)中的蛋白质LmSerpin7的编码基因可通过将序列1第27-1184位所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了与LmSerpin7蛋白质相关的生物材料。

本发明提供的与LmSerpin7蛋白质相关的生物材料为下述A1)至A8)中的任一种：

A1)编码LmSerpin7蛋白质的核酸分子；

A2)含有A1)所述核酸分子的表达盒；

A3)含有A1)所述核酸分子的重组载体；