[发明专利]一种减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液及其制备方法

说明书

本发明提供了一种减轻内质网应激的4‑苯基丁酸溶液及其制备方法，属于溶剂配制技术领域。所述方法包括如下步骤：1)将4‑苯基丁酸与无血清DME/F‑12培养基混合，将得到的共混物在48～52℃的水浴中涡旋8～12min，得到预处理液；2)将所述步骤1)的预处理液静置22～26h，得到减轻内质网应激的4‑苯基丁酸溶液。本发明通过将含有4‑苯基丁酸的DME/F‑12培养基置于空气中，使溶液碱性化，平衡酸性物质对细胞的损害，从而使制备得到的减轻内质网应激的4‑苯基丁酸溶液能够减小对细胞的毒性。

技术领域

本发明属于溶剂配制技术领域，具体涉及一种减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液及其制备方法。

背景技术

内质网是细胞中一种重要的膜性网状细胞器，主要参与蛋白质、脂类和糖类的合成和代谢、调控钙离子的储存和释放。在人体各组织和器官细胞中，肝细胞中内质网最为丰富。当机体出现生理或者病理因素(营养缺乏、酸中毒、病毒感染等)时均可导致内质网稳态被破坏。而内质网稳态一旦遭到破坏，内质网内的钙离子水平骤变、错误折叠蛋白和未折叠蛋白累积均可诱导内质网应激(endoplasmicreticulum stress，ERS)，继而出现未折叠蛋白反应和应激反应。未折叠蛋白反应是介导ERS的重要环节，持续强烈的ERS会激活细胞的凋亡信号通路。很多疾病均与内质网应激有关，如心血管疾病、呼吸系统疾病、病毒性肝炎、自身免疫性疾病等。探讨内质网应激与其相关疾病分子机制已成为近年来的新挑战。

目前诱导内质网应激的诱导剂包括毒胡萝卜素、衣霉素、油酸、硬脂酸、棕榈酸等。4-苯基丁酸(PBA)可以作为一种分子伴侣，逆转蛋白质分子的错误移位或错误聚集，帮助其建立正常的空间结构，从而减轻内质网的负担、抑制内质网应激信号感应，减轻内质网应激导致的组织损伤。内质网诱导剂和PBA的使用，可以更加充分探讨内质网应激的分子机制，但现有技术中配制PBA溶液的方法为采用水浴使4-苯基丁酸得到PBA溶液，但这种溶液呈酸性，对细胞有明显的细胞毒性作用，采用碳酸氢钠或氢氧化钠将PH值调至细胞培养最适PH值后，仍对细胞有明显的损伤作用。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液及其制备方法，本发明提供的制备方法使配制得到的4-苯基丁酸溶液能够有效减轻对细胞的毒害作用。

为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液的制备方法，包括如下步骤：

1)将4-苯基丁酸与无血清DME/F-12培养基混合，将得到的共混物在48～52℃的水浴中涡旋8～12min，得到预处理液；

2)将所述步骤1)的预处理液静置22～26h，得到减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液。

优选的，所述步骤1)中4-苯基丁酸与无血清DME/F-12培养基的质量体积比为32.8mg:20mL。

优选的，所述步骤1)中涡旋的时间为10min。

优选的，所述步骤2)中静置时在超净台紫外线照射条件下进行。

优选的，所述步骤2)中进行静置后还包括过滤除菌。

优选的，所述过滤除菌的方法为膜过滤除菌，所述膜的孔径为0.22μm。

优选的，所述步骤2)中静置的时间为24h。

本发明提供了一种上述方案所述方法制备得到的减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液。

优选的，当所述减轻内质网应激的4-苯基丁酸溶液进行稀释时，采用质量浓度为15％～20％的胎牛血清培养基进行稀释。

与现有技术相比，本发明提供的技术方案具有以下优点：