[发明专利]获得巨核细胞及血小板的方法

权利要求书

1.一种用于将红系细胞重编程为巨核细胞及血小板的培养基，其特征在于，所述培养基由基础培养基；以及

式(1)所示的化合物，

式(2)所示的化合物、式(3)所示的化合物以及丙戊酸组成，

其中，所述基础培养基选自添加有重组人干细胞因子；

白细胞介素-3；

白细胞介素-6；以及

促血小板生长因子的StemSpan培养基，

所述丙戊酸的浓度为0.1～0.3mM；

所述式(1)所示化合物的浓度为0.3～0.7μM；

所述式(2)所示化合物的浓度为0.02～0.07μM；

所述式(3)所示化合物的浓度为0.2～0.7μM；

所述重组人干细胞因子的浓度为30～60ng/mL；

所述白细胞介素-3的浓度为10～30ng/mL；

所述白细胞介素-6的浓度为30～60ng/mL；

所述促血小板生长因子的浓度为30～60ng/mL。

2.权利要求1所述的培养基在获得巨核细胞及血小板中的用途，其特征在于，所述巨核细胞及血小板是通过将红系细胞进行重编程而获得的。

3.一种获得巨核细胞及血小板的方法，其特征在于，包括：

将红系细胞置于含有权利要求1所述培养基中，进行培养5～10天，以便获得巨核细胞及血小板。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述红系细胞是通过下列方式获得的：

将单个核细胞用红系细胞诱导培养基进行培养，收集细胞，洗涤，重悬，以便得到第一重悬细胞液；

向所述第一重悬细胞液中加入抗体，孵育，洗涤，重悬，以便得到第二重悬细胞液；

将所述第二重悬细胞液进行流式分选，收集CD235a⁺CD41a^-细胞，以便得所述红系细胞。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述红系细胞诱导培养基选自添加有重组人干细胞因子；

促血红细胞生长素；

胰岛素样生长因子-1；

运铁蛋白；以及

地塞米松的StemSpan培养基，

其中，所述重组人干细胞因子的浓度为80～120ng/ml；

所述促血红细胞生长素的浓度为3～8U/ml；

所述胰岛素样生长因子-1的浓度为30～60ng/ml；

所述运铁蛋白的浓度为80～120μg/ml；

所述地塞米松的浓度为0.8～1.5μM。