[发明专利]水生动物组织中百菌清残留的检测分析方法

说明书

本发明公开了一种水生动物组织中百菌清残留的检测分析方法，属于检测技术领域，该检测分析方法包括以下步骤：1)水生动物组织中百菌清的提取；2)水生动物组织中百菌清检测。该方法在完成水生动物组织中百菌清提取的基础上，对样品前处理、色谱条件和检测方法等进行优化，使得该检测分析方法处理效率高，快速检测、高灵敏性，特别是能在水生动物组织中精准定量百菌清，为全面普查水生动物组织中百菌清的含量水平及分布特征提供可靠的分析手段。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，具体的说是一种水生动物组织中百菌清残留的检测分析方法。

背景技术

百菌清(chlorothalonil)化学名称为四氯间苯二腈，是一种非内吸性、广谱、高效的保护性杀菌剂，对多种作物的真菌病害具有防治作用。其杀菌机理是与真菌细胞中的磷酸甘油醛脱氢酶发生作用，结合脱氢酶体中含有半胱氨酸的蛋白质，使脱氢酶丧失活性，破坏真菌细胞的新陈代谢，从而导致真菌的死亡。

百菌清从生产开始，至今在世界农业生产中的使用已经超过50年，由于广泛和长期使用，在农作物和自然生态环境中都检测到百菌清的残留，对环境和食品安全具有潜在威胁。百菌清对人和哺乳动物低毒，会引起皮肤炎症、眼睛不适和胃肠刺激等症状，对鱼、贝类等水生生物高毒，美国国家环境保护总署已经将其列为可能使人类致癌的物质之一。我国2012年修订的《生活饮用水卫生标准》首次将百菌清列入了监测范围。

201210338528.0公开了一种快速、灵敏的检测果蔬表面农药(其中包括百菌清)残留的方法，以离子迁移谱技术为基本检测技术，采用正、负离子模式，建立了离子迁移谱检测农药残留的快速定性、半定量分析方法。将含有不同农药样品的采样薄片，烘干溶剂送入到离子迁移谱热解析进样器内进行检测分析获得检测信号，通过样品峰迁移时间和信号强度进行定性和半定量分析。该方法为定性和半定量分析，不能准确分析百菌清的具体含量水平。

201210137297.7公开了一种检测牛组织中氟佐隆残留量的方法，该方法是将牛组织样品经过提取、净化后，以乙腈-水为流动相,高效液相色谱-紫外检测法检测；液相色谱条件为：色谱柱，AgilentC18，5μm，150mm×4.6mmi.d.；流动相，体积比为68/32的乙腈-水；流速：1.2mL·min^-1；检测波长：260nm；柱温：25℃；进样体积：20mL。该方法所测得牛组织中氟佐隆的LOD为0.005mg·kg^-1；LOQ脂肪为0.01mg·kg^-1，其他组织为0.02mg·kg-1，能够满足关于动物性食品中氟佐隆药物残留分析的要求。但是其检出限仍然较高。

因此，目前亟需研究出适用于水生动物组织中百菌清残留的检测分析方法，为全面普查水生动物组织中百菌清的含量水平及分布特征提供可靠的分析手段。

发明内容

本发明的目的在于提供一种水生动物组织中百菌清残留的检测分析方法，操作简单、方法可靠、回收率合理，其加标回收率为70～110％，RSD小于10％，并且检出限较低(检出限可以达到0.012μg/L)，在水生生物分析检测领域具有广阔的应用前景。

本发明解决其技术问题所采取的技术方案是：

水生动物组织中百菌清残留的检测分析方法，包括以下步骤：

(1)水生动物组织中百菌清的提取

①取水生动物组织样品和蛋白酶置于离心管一中，超声，涡旋，静置；

②萃取：在步骤①静置完毕的离心管一中加入萃取溶剂，涡旋，加入CH₃COONa和无水MgSO₄，涡旋，振荡，离心，取出萃取液并冷冻；