[发明专利]一种S100B蛋白的检测试剂盒及其使用方法

说明书

本发明适用于生物技术领域，具体涉及一种S100B蛋白的检测试剂盒及其使用方法，所述试剂盒包括：包被有抗S100B单克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的检测用抗S100多克隆抗体溶液、标准品、标准品稀释液、样本稀释液、浓缩洗涤液、显色液A、显色液B、终止液以及检测抗体稀释液。本发明试剂盒灵敏度较高，试剂盒的最低检测限低至1pg/mL；均一性良好，稳定性高，批内变异系数小于10％，批间变异系数都小于5％；特异性好，试剂盒与血清中易干扰测试的血清总胆红素TBIL、甘油三酯TG和总胆固醇TC的交叉反应很低，不会对S100B的测量造成干扰；临床试用效果良好，且单次检测成本低于市场上同类型试剂盒。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种S100B蛋白的检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

S100B蛋白是一种存在于脑内胶质细胞中的特异性蛋白，具有广泛的生物学活性，生理浓度下发挥多种重要的生理学功能，包括影响神经胶质细胞的生长、繁殖和分化，维持钙稳态，并可能对学习记忆等发挥一定的作用等。当脑损伤造成神经胶质细胞膜受损时，S100B蛋白释放至细胞外间隙，并通过受损血脑屏障进入脑脊液和血液，其血清中的含量与一些神经系统等疾病的病情及预后关系密切。

目前，颅脑损伤和脑血管性疾病的诊断主要依靠影像学(CT和MRI)检查，但这些现代的影像学技术尚不适用于某些生命体征不稳定或正在使用呼吸机的危重患者，在某些特殊情况下，往往无法及时进行上述检查。因此，检测S100B蛋白水平可以为颅脑损伤和脑血管疾病诊断及预后判断提供一种新的手段，而准确、方便且快捷的检测血清中S100B蛋白的水平尤为重要。

目前对于血清S100B的检测方法包括：放射免疫分析法(RIA)、免疫放射测定法(IRMA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、电化学发光法(ECLIA)等。因为RIA与IRMA由于具有放射性，核素半衰期和试剂盒稳定期短，操作繁琐，使之在临床中应用受到限制。目前临床上主要采用的是ELISA和ECLIA法。

电化学发光法(ECLIA)是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。该方法是利用链霉亲和素包被的磁珠和生物素化的抗体与S100B抗体连接为一体，形成双抗体夹心，最后通过与抗体偶联的发光剂和电子供体TPA通过氧化还原反应在电极表面周而复始地进行，光强度与发光剂的浓度呈线性关系从而测出待测抗原的含量。电化学发光法的优点包括：标记物可再循环利用，发光时间更长、强度更高、易于测定，其敏感度高，可达pg/mL水平，且反应时间短、试剂稳定性好，但是临床应用时需基于配套的大型仪器来进行检测，该仪器以及电极的更换价格较贵，导致检测费用较高，限制了其在基层医院的开展。

酶联免疫吸附试验(ELISA)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。ELISA法的优点是：线性范围广，灵敏度高，重复性好，操作方便，实验可靠，比较适合用于临床对于患者疾病的检测以及预后的判断，是目前主流的检测方法之一，但是目前临床上广泛使用的双抗体夹心ELISA检测法，测定的敏感性都比较低，这主要与所用标准品多为S100B/S100A蛋白二聚体有关，即试剂盒所测定的实际上是S100B和S100A两种蛋白的含量，同时抗体的特异性与亲和力不理想也是导致灵敏度不高的部分原因。

综上，现有的对于血清S100B的检测方法存在检测费用较高、检测灵敏度更低，特异性和稳定性差的问题。

发明内容

本发明实施例提供一种S100B蛋白的检测试剂盒，旨在解决现有的对于血清S100B的检测方法存在检测费用较高、检测灵敏度更低，特异性和稳定性差的问题。

本发明实施例提供的一种S100B蛋白的检测试剂盒，包括：包被有抗S100B单克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的检测用抗S100多克隆抗体溶液、标准品、标准品稀释液、样本稀释液、浓缩洗涤液、显色液A、显色液B、终止液以及检测抗体稀释液。