[发明专利]水稻清蛋白的提取方法及电泳检测方法

权利要求书

1.水稻清蛋白的电泳检测方法，其特征在于，稻米经自然风干后，研磨成大米粉，向大米粉中按固液比1g：1mL加入水，搅拌至均匀，浸提1h后于15000r/min离心5min，取上清液，即为水稻清蛋白提取液；

将水稻清蛋白提取液与蛋白提取液混合，静置一段时间后，离心，取上清液进行SDS-PAGE电泳检测；

其中，所述蛋白提取液为：0.125mol/L Tris-HCl pH6.8，4％SDS，20％甘油，4mol/L脲素，5％β-巯基乙醇；

所述稻米来源于水稻品种龙粳香1号、高粱稻；

电泳检测包括以下步骤：

1)取100μL水稻清蛋白提取液于离心管内，加入100μL蛋白提取液，振荡混匀，4℃静置30min；然后10000r/min离心5min，取上清进行SDS-PAGE电泳；

2)电泳结束，取出凝胶，于三氯乙酸溶液中固定；

3)染色与脱色：将固定后的凝胶转移至考马斯亮蓝R-250溶液中，摇床染色，然后脱色；

步骤1)进行SDS-PAGE电泳所配制的凝胶为：15％的分离胶和4％的浓缩胶；在分离胶中，电压为100V，至浓缩胶时，电压降至80V，电泳总时长2.5h。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)将凝胶于10％三氯乙酸溶液中固定2h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中摇床转速70r/min，染色2h。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，步骤1)SDS-PAGE电泳的进样量为10μL/孔。