[发明专利]一种SMCC的精制方法

说明书

本发明涉及化合物的纯化/精制，具体公开了一种SMCC的精制方法。本发明所述的精制方法通过将化学合成得到的含有式II所示杂质的SMCC粗品采用乙腈作为溶剂进行重结晶，在提高SMCC纯度的同时有效降低该杂质的含量。本发明还进一步通过控制重结晶过程中乙腈的用量，获得一种更为优异的效果，得到SMCC纯度不小于99.9％、杂质含量小于0.1％的高纯度SMCC产品。

技术领域

本发明涉及化合物的纯化/精制，具体地说，涉及对SMCC的精制方法。

背景技术

SMCC，化学名称：4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯(化学结构式如式I所示)，CAS：64987-85-5，是一类含有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯和马来酰亚胺的双功能偶联剂，可分别将含有巯基和氨基的化合物键接在一起，可作为链接子将抗体与毒素分子连接起来，在免疫实验、肿瘤成像的放射性标记中广泛应用。

Yoshitake等人首次报道以反式胺甲环酸为起始物料合成SMCC，首先将反式氨甲环酸与马来酸酐反应生成反式氨甲环酸的马来酰胺，用乙酸钠/乙酸酐关环，再用氯化亚砜将羧基转化为酰氯，与N-羟基丁二酰亚胺反应得到SMCC粗品，经过丙酮重结晶后得到SMCC纯品，收率25％左右。具体路线如下：

但该工艺中使用了氯化亚砜强腐蚀性的试剂，并且使用了剧毒的苯作为溶剂，不符合绿色化学的理念，尤其不符合药物合成溶剂的使用规范。

Nielsen和Buchardt报道了以反式胺甲环酸在DMF中与马来酸酐反应，再在DCC的作用下与N-羟基丁二酰亚胺反应生成SMCC粗品，产物以二氯甲烷溶解后用水洗涤，蒸除二氯甲烷得到SMCC纯品，收率75％。具体路线如下：

但该工艺中使用了DCC作为缩合剂，处理工艺繁琐且非常难以去除干净。

Paterson和Eggleston报道以TFA-NHS作为酯化试剂合成SMCC，首先马来酸酐与反式氨甲环酸反应生成反式氨甲环酸的马来酰胺，然后再与TFA-NHS反应生成SMCC粗品，再以二氯甲烷-正己烷重结晶后得到SMCC纯品，收率89％。具体路线如下：

不足之处在于，此方法需要单独分离出反式氨甲环酸的马来酰胺，操作繁琐。

之后，Nicholas和Jarmila发现TFA-NHS试剂可以同时促进反式氨甲环酸的马来酰胺环合和酯化，并于2011年报道了“一锅法”合成SMCC，采用水洗及乙醚打浆后，总收率超过90％。具体路线如下：

该方法相对早期报道的方法，操作更为简单，适合工业化生产。

王新增等人采用Nicholas和Jarmila报道的“一锅法”反应生成SMCC，然后水洗、浓缩，得到SMCC固体后，用二氯甲烷和正庚烷重结晶得到SMCC，收率92％，纯度大于99％(偶联试剂SMCC的一锅法合成，广州化学，2016，41(5)，1-4)。

然而，以上报道的SMCC合成方法都未涉及对最大单杂的研究控制。“一锅法”合成SMCC是目前最有效的合成工艺，根据本发明发明人的研究结果，该工艺最容易产生和难以去除的杂质A为4-[[[(2E)-4-[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]-1，4-二氧代-2-丁烯-1-基]胺基]甲基]-2，5二氧代-1-吡咯烷基反式氨甲环酸酯，其结构如式II所示。

它是由该工艺生成的中间体反式氨甲环酸马来酰胺与TFA-NHS反应生成，按照已有文献报道的精制方法，该杂质很难去除。同时由于该杂质为活性酯结构，很容易在与毒素和抗体的反应中引入其他杂质，因此需要严格控制。

发明内容