[发明专利]一种亚临界水提取灯盏花中总黄酮成分的方法

说明书

本发明涉及一种亚临界水提取灯盏花中总黄酮成分的方法，将灯盏花按照部位分离，分别进行粉碎，得到不同部位粉碎后的样品；将样品放入亚临界水提取装置中，加入去离子水，灯盏花样品与去离子水的体积比为1:15‑1:30，提取5‑30min后，利用纯甲醇冲洗反应釜，用纯甲醇提取冲洗液，取提取液的上层清液，通过有机膜过滤得到样品溶液，利用HPLC对样品溶液进行检测，得到包括绿原酸、灯盏花乙素、异丹酚酸B、异丹酚酸A、灯盏花甲素、异丹酚酸C、野黄芩素的总黄酮，总黄酮提取率为10.76％，HPLC能够将每种成分进行分离纯化。

技术领域

本发明属于植物成分提取技术领域，具体涉及一种亚临界水提取灯盏花中总黄酮成分的方法。

背景技术

灯盏花又名灯盏细辛、东菊，灯盏花中的黄酮类有效成分具有增加血流量、改善微循环、扩张血管、降低血液粘度、降血脂、促纤溶、抗血栓、抗血小板聚集等作用，现有技术中对灯盏花的黄酮成分的提取的方法有水回流提取法、超临界CO₂提取法、超声波提取法、双水相与超声耦合提取法、大孔吸附树脂法，这些方法主要是有机溶剂法提取和以水作溶剂在常温常压下的提取，对环境产生很大的毒害，回收复杂，并且价格也偏高。这些方法存在分子量大于500的极性成分的提取率低的问题。

对比文件1，201511007502.8，中记载了灯盏细辛，利用乙醇或水回流提取的方法，然后将提取液用苯乙烯大孔树脂层析柱进行分离，得到含有灯盏花甲素的清膏；对比文件2中200310113536.6，记载了取灯盏细辛粗粉，用碱溶液常温下提取，回流提取，用聚酰胺柱进行吸附，得到提取物，上述文献的提取方法，对总黄酮成分的提取率较低，目前尚没有一种对灯盏花的总黄酮成分提取率较高的方法。

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题，本发明的一个目的是提供一种亚临界水提取灯盏花中总黄酮成分的方法。本申请通过对灯盏花的总黄酮成分的提取进行研究，样品的颗粒度、料液等因素对灯盏花中总黄酮成分的提取效果具有很大的影响。

为了解决以上技术问题，本发明的技术方案为：

一种亚临界水提取灯盏花中总黄酮成分的方法，具体步骤为：

1)灯盏花的预处理

将灯盏花按照部位分离，分别进行粉碎，得到不同部位粉碎后的样品；将不同部位粉碎后的样品进行混合，得到的灯盏花样品的颗粒度为20-100目；

2)将步骤1)得到灯盏花样品放入亚临界水提取装置中，加入去离子水，灯盏花样品与去离子水的体积比为1g:15mL-1g:30mL，提取5-30min后，利用纯甲醇冲洗反应釜；

3)用纯甲醇提取步骤2)得到的冲洗液得到提取液，取提取液的上层清液，通过有机膜过滤得到样品溶液，利用HPLC对样品溶液进行检测。

本申请的亚临界水提取灯盏花中黄酮的方法得到的总黄酮提取率为10.76％，相比于现有技术的提取方法，总黄酮的提取率大大提高。

对提取率的影响的因素可以从很多方面来考虑，本申请的发明人发现料液比、提取时间、提取温度、颗粒度均对总黄酮成分的提取具有很大的影响，并且如果选择的因素的值不同，效果相差1000倍，所以对于这些因素的设置是发明人的创新性发现。

亚临界水在一定的温度下、一定的压力下形成的，在一定的温度、压力范围内，亚临界水的极性在一定的范围内发生变化，本申请的灯盏花中的总黄酮成分的提取，是与亚临界水的极性有关，当亚临界水的极性在一个范围的时候，能够与灯盏花中的黄酮的极性相匹配，所以能够提取出来更多的黄酮成分，所以能够提高灯盏花总黄酮的提取率。

优选的，所述步骤1)中灯盏花样品的颗粒度为70-100目。

优选的，所述步骤2)中提取的温度为100-170℃；优选为120-140℃。