[发明专利]一种从红豆杉中高效提取紫杉醇的方法

说明书

本发明公开了一种从红豆杉中高效提取紫杉醇的方法，其步骤在于：1)、原材料的准备；2)、预处理；3)、有机溶剂粗提；4)、细粉的处理；5)、初级萃取；6)、C18固相萃取；7)、重结晶；本发明提供了一种操作简单、成本低、重复性好、产品纯度高的高效分离纯化紫杉醇的方法；本发明以超声辅助酶解为浸提手段，所用溶剂量较传统方法大大降低，且提取效率高，酶解过程在弱酸存在下进行，有效减少了对杂质的浸提量，为后续处理提供了方便，简单快速的柱层析过程能够迅速除去脂溶性杂质，减少纯化过程中有机溶剂的用量，弱碱性树脂和强碱性树脂的联合使用，可快速、高效分离出紫杉醇及性质相近的杂质。

技术领域

本发明涉及紫杉醇提取领域，具体涉及一种从红豆杉中高效提取紫杉醇的方法。

背景技术

红豆杉(俗称紫杉，yew)植物分类归于裸子植物亚门(Gymnospcrloe)，在我国医学中早有记载：《本草纲目》就记有红豆杉治疗霍乱、伤寒、排毒等疗效。1971年美国化学家Wani等从产于北美的短叶红豆杉(T.brevifolia) 树皮中分离出高抗癌活性紫杉烷二萜化合物紫杉醇，发现紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用，它能与微管蛋白质结合，形成稳定的稳管束，并使被解聚，将癌细胞停止在G2晚期或M期，抑制细胞复制，阻止癌细胞Z增殖。这一奇特的功效引起了NCI的高度重视，促进了临床试验研究。紫杉醇临床研究始于1982 年，到1989年完成了I、II期的临床试验，1990年进行III期临床试验。 1992年12月29日美国国家食品与药物管理局(FDA)正式批准其作为晚期卵巢癌、肺癌、子宫癌等抗癌药物上市，紫杉醇是红豆杉中主要活性成分，是萜类环状结构的天然次生代谢衍生物，因其含量低、结构类似物较多、纯度要求高、分离过程中易转化等因素，给提取、分离和测定带来了较大的困难，如何以低成本、简单的工艺提取紫杉醇，将紫杉醇与其类似物分离(如与类似物三尖杉宁碱的分离)，获得纯度较高的紫杉醇产品，并对其进行精确的测定就成为研究的重点

常用的提取方法有：甲醇提取-有机溶剂萃取法、乙醇提取-有机溶剂萃取法等。萃取又可分为初级萃取和次级萃取，在这两级萃取过程中，溶剂的选择具有重要影响。常用的纯化方法有：正相柱色谱法和反相色谱法主要包括常压和低压柱层析、干柱层析、制备性HPLC等法，以及一些较先进的分离手段如HSCCC(高速逆流色谱)等

紫杉醇作为一种生物大分子物质，受温度、有机溶剂、酸、碱等环境条件的影响，易降解或异构生成其它紫杉烷类物质。如紫杉醇在强酸性或弱碱性环境条件下会降解为巴卡亭III或发生表位异构生成7-表紫杉醇；温度较高时也会发生降解反应，生成相应的小分子物质

在初级萃取过程中采用超声技术，进行超声震荡，以促进原料中物质的溶解，萃取过程所需的时间大为缩短。如果用红豆杉植物体的枝叶作为紫杉醇的来源，由于枝叶特别是叶片中含有许多色素和蜡质，无疑将大大增加紫杉醇提取分离的难度。

由于用来提取紫杉醇的天然红豆杉资源有限，且天然红豆杉属于国家珍惜保护植物，因而天然紫杉醇原料药的生产和供应受到限制，远远不能满足紫杉醇的临床应用，现在人们大规模种植红豆杉，从中提取紫杉醇等物质，以满足临床需要。但因红豆杉种植生产周期长，生产成本较高，传统提取方法效率低，资源浪费严重，因而寻找一种从红豆杉中高效提取紫杉醇的方法具有非常重要的意义。

目前有关紫杉醇类物质的提取方法，大多采用有机溶剂对红豆杉原料多次浸提，浸提液回收后再用有机溶剂萃取，再经层析分离后结晶得到紫杉醇。这些方法存在最大问题是提取收率低，设备昂贵，并且造成了巨大的资源浪费，提高了生产成本，存在较大环保问题。

发明内容

发明目的：本发明所解决的技术问题在于提供一种有效解决了提取收率低、设备昂贵的问题，且环境友好，所得产品纯度大于90％的红豆杉中高效提取紫杉醇的方法。

技术方案：一种从红豆杉中高效提取紫杉醇的方法，其步骤在于：1)、原材料的准备；2)、预处理；3)、有机溶剂粗提；4)、细粉的处理；5)、初级萃取； 6)、C18固相萃取；7)、重结晶；