[发明专利]抗RSPO3抗体

说明书

一种分离的抗体，包含：重链可变区序列的重链互补决定区CDR1、CDR2和CDR3，该重链可变区序列系选自SEQ ID NOs：2、6、10和14；以及轻链可变区序列的轻链互补决定区CDR1、CDR2和CDR3，该轻链可变区序列系选自SEQ ID NOs：4、8、12和16；其中，该抗体与RSPO3蛋白特异性地结合。

【技术领域】

本申请案主张2018年12月7日于美国智慧财产局提出之临时申请案第62/595,845号案之优先权，该等申请案之整体内容系合并于此参考。

【先前技术】

R-脊椎蛋白(R-spondin，RSPO)分泌蛋白有RSPO1、2、3和4四类，该蛋白家族包含血小板反应素I型重复区(thrombospondin type 1 repeat，TSR-1)之结构域(domain)，参见Jin and Yoon(2012)，The international journal of biochemistrycell biology(44)：2278-2287。人类的RSPO蛋白家族成员具有40％-60％的胺基酸序列相似性，分别由234至272个胺基酸组成，包含：(i)N端疏水性讯息胜肽，用于促进RSPO的分泌；(ii)两个富含半胱胺酸的furin-like结构域(furin-like cysteine-rich domain，FU-CRD)；(iii)血小板反应素I(TSR-1)结构域；以及(iv)C端区域具有带正电荷残基且富含碱性胺基酸结构域。其中，FU-CRD对于RSPO促进Wnt/β-catenin讯息传递(Wnt/β-catenin-dependentsignaling)具有调节功能，参见de Lau et al.(2012).Genome biology(13)：242；及Kimet al.(2008).Molecular biology of the cell(19)：2588-2596。而TSR-1结构域则在Frizzled(Fz)/平面细胞极化(planar cell polarity，PCP)讯息传递调控中，扮演了稳定结构机转之角色。

RSPO在脊椎动物发育和干细胞生长中具有多效功能。一些研究证实RSPO可增强Wnt途径的讯息传递，以活化β-catenin蛋白与Wnt配体，目前有两个机制模型说明，参见Jinand Yoon(2012)；de Lau et al(2014).Genesdevelopment(28)：305-316；Kontermann，R.E.(2012).Archives of biochemistry and biophysics(526)：194-205。其中一个模型提出RSPO系直接结合到LRP5/6和LGR4/5/6受体作为活化配体，在受体上和Wnt与FZD一起活化癌细胞中Wnt/β-catenin蛋白讯息传递，参见Wang et al.(2013)Genesdevelopment(27)：1339-1344。或者，RSPO还可透过干扰DKK1介导的LRP6和Kremen结合，以拮抗DKK1介导的胞吞作用。在另一个模型中，RSPO结合至ZNFR3以及其同源物RNF43作为负回馈调节剂，以加速在细胞表面的FZD和LRP6受体的转换率，参见Jin和Yoon(2012)。