[发明专利]用于神经变性疾病和神经炎性疾病的诊断和预后的方法

说明书

本发明涉及用于由神经学疾病、神经变性疾病和/或衰老疾病引起的脑炎症状态的早期诊断和预后的方法。所述方法基于定性‑定量评价在受试者血浆中的小神经胶质微囊泡。

技术领域

本发明涉及用于由神经学疾病、神经变性疾病和/或衰老疾病引起的脑炎症状态的早期诊断和预后的方法。所述方法基于定性-定量评价在受试者血浆中的小神经胶质微囊泡。

现有技术

用于阿尔茨海默病(AD)和其他形式的与神经炎症和/或神经变性和衰老相关的痴呆和疾病(例如，帕金森病、多发性硬化、神经性疼痛)的诊断和预后的生物标志物的鉴定和验证越来越重要。

迄今为止，通过ELISA测定法来定量测量在脑脊液(CSF)中的β-淀粉状蛋白(1-42)、总tau和磷酸化tau-181是最先进的和公认的用于诊断AD的发病概率的方法。

在CSF中，已证明了与神经炎症和与AD相关的小神经胶质微囊泡的增加(Agosta F等人,Myeloid microvesicles in cerebrospinal fluid are associated with myelindamage and neuronal loss in mild cognitive impairment and Alzheimerdisease.Ann Neurol.2014 76(6):813-25)。

最近已经鉴定出一种能够选择性地鉴定小神经胶质从而将其与骨髓系统中的其他细胞区分开的标志物。所述标志物为跨膜蛋白119(Tmem119)(Bennett ML等人,Newtools for studying microglia in the mouse and human CNS.Proc Natl Acad SciUSA 2016113(12):E1738-46)。Bennett等人描述了能够识别Tmem119的细胞内结构域和细胞外结构域的单克隆抗体，其允许在脑的组织学切片中的小神经胶质的免疫染色。

新的生物标志物(其测量是可重复的，和优选地在血液样品中是可能的)的鉴定仍然是主要挑战。

发明描述

本发明的作者令人惊讶地显示，在受神经炎性疾病、神经变性疾病和/或衰老疾病(例如，AD和额颞叶痴呆(FTD))侵袭的患者的血液样品中存在小神经胶质微囊泡，但在健康个体中不存在。

因此，本发明涉及一种用于由神经学疾病、神经变性疾病、炎性疾病和/或衰老疾病引起的脑炎症状态的早期诊断的方法，其中所述方法包括在血浆样品中定性-定量测量小神经胶质微囊泡。

所述方法包括：

-对血浆样品进行分级分离以分离出微囊泡级分，其中所述分级分离通过将所述血浆样品以大约14000g离心10秒钟至40分钟(优选地，大约30分钟或20分钟)的时间来进行；

-分析所述微囊泡级分以鉴定小神经胶质微囊泡；

其中在所述样品中所述小神经胶质微囊泡的存在指示了神经炎性疾病、神经变性疾病和/或神经学疾病和/或衰老疾病。

所述小神经胶质微囊泡的鉴定通过本领域技术人员已知的方法来进行。在一个优选的实施方案中，所述方法包括在从所述血浆样品中分离出的小神经胶质微囊泡级分中测量一种或多种特异性小神经胶质微囊泡标志物。在一个优选的实施方案中，所述至少一种标志物为Tmem119。

与Tmem119相关的优点与下述事实有关：在本文中令人惊讶地观察到其在血浆中的延长的稳定性。

在一个实施方案中，所述一种或多种标志物通过免疫学方法来进行测量。在一个进一步的实施方案中，所述测量通过分子分析来进行。

根据本发明的方法令人惊讶地在神经变性疾病和神经学疾病的早期诊断中是有利的。