[发明专利]APOM-FC融合蛋白及其用途

说明书

本文中提供了工程化融合蛋白，其包含与免疫球蛋白G(IgG，例如人IgG或鼠IgG)的恒定区(Fc)融合的ApoM(例如人或鼠ApoM)。在一些实施方案中，ApoM‑Fc融合蛋白还包含与ApoM融合的信号肽(例如，IL‑2信号肽)，其允许融合蛋白重组表达后被分泌。提供了在多种疾病或病症的治疗中使用ApoM‑Fc融合蛋白或海绵变体的方法。

相关申请

本申请根据35 U.S.C.§119(e)要求于2017年8月15日提交的标题为“APOM-FCFUSION PROTEINS AND USES THEREOF”的美国临时申请No.62/545,629的权益，其全部内容通过引用并入本文中。

政府支持

本发明是在由国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的基金号1R35HL135821-01和R01HL89934的政府支持下完成的。政府对本发明享有一定的权利。

背景技术

载脂蛋白M(ApoM)与脂质介导的1-磷酸鞘氨醇(S1P)和分子伴侣S1P结合，以激活细胞表面G蛋白偶联受体(S1P受体)，从而诱导细胞应答。ApoM/S1P复合物涉及急性和慢性疾病病症。在多种疾病中观察到ApoM/S1P复合物的异常水平和/或活性。

发明内容

本文中提供了工程化融合蛋白，其包含与免疫球蛋白G(IgG，例如人IgG或鼠IgG)的恒定区(Fc)融合的ApoM(例如人或鼠ApoM)，所述工程化融合蛋白在本文中被称为“ApoM-Fc融合蛋白”。在一些实施方案中，ApoM-Fc融合蛋白还包含与ApoM融合的信号肽(例如，IL-2信号肽)，其允许融合蛋白被分泌。在一些实施方案中，本文中所述的融合蛋白能够结合S1P并激活S1P受体。在一些实施方案中，设计了对S1P具有更高结合亲和力的融合蛋白变体(在本文中被称为“海绵变体”)。提供了在多种疾病或病症的治疗中使用ApoM-Fc融合蛋白或海绵变体的方法。

因此，本公开的一些方面提供了融合蛋白，其包含与免疫球蛋白(IgG)的恒定区(Fc)融合的载脂蛋白M(ApoM)。在一些实施方案中，融合蛋白还包含与ApoM融合的信号肽。在一些实施方案中，免疫球蛋白是IgG。在一些实施方案中，IgG是IgG1。

在一些实施方案中，ApoM融合在Fc的N端。在一些实施方案中，ApoM是人ApoM或鼠ApoM。在一些实施方案中，Fc是人Fc或鼠Fc。在一些实施方案中，ApoM是人ApoM，并且Fc是人Fc。在一些实施方案中，ApoM是鼠ApoM，并且Fc是鼠Fc。

在一些实施方案中，Fc包含与SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少99％或至少99.5％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，Fc包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的氨基酸序列。在一些实施方案中，Fc由SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的氨基酸序列组成。

在一些实施方案中，ApoM包含与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，ApoM包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸序列。在一些实施方案中，ApoM由SEQ ID NO:5或SEQID NO:6的氨基酸序列组成。

在一些实施方案中，融合蛋白包含与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:68具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，融合蛋白包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:68的氨基酸序列。在一些实施方案中，融合蛋白由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:68的氨基酸序列组成。