[发明专利]用于1型糖尿病诊断的基于脂蛋白体的ZNT8自身抗原

权利要求书

1.一种检测血清中的ZNT8抗体的方法，所述方法包括：

提供具有内部和外部的脂蛋白体的集合，其中一些脂蛋白体在其外部具有ZnT8的跨膜结构域(TMD)的蛋白序列，而其他脂蛋白体包含暴露在其外部的ZnT8蛋白的胞质结构域(CTD)的蛋白序列；

添加包含抗体的血清，所述抗体靶向形成与所述抗体结合的脂蛋白体的TMD的蛋白序列和/或CTD的蛋白序列；

添加标记的捕获的自身抗体，所述标记的捕获的自身抗体与结合至所述脂蛋白体的所述抗体结合；以及

测量靶向所述TMD的蛋白序列和/或所述CTD的蛋白序列的与所述脂蛋白体结合的抗体的量。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述TMD的蛋白序列和所述CTD的蛋白序列是全长ZnT8蛋白的一部分。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述ZnT8蛋白是人类蛋白。

4.如权利要求2所述的方法，其中所述全长ZnT8蛋白是人类ZnT8的325R多态性变体。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述脂蛋白体的集合包含内侧外翻型脂蛋白体和正常外向型脂蛋白体。

6.如权利要求4所述的方法，其中内侧外翻型脂蛋白体在其外部包含CTD蛋白序列。

7.如权利要求5所述的方法，其中所述CTD蛋白序列是全长ZnT8蛋白的一部分。

8.如权利要求4所述的方法，其中所述正常外向型脂蛋白体在其外部包含TMD蛋白序列。

9.如权利要求7所述的方法，其中所述TMD蛋白序列是全长ZnT8蛋白的一部分。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述脂蛋白体的集合在芯片上。

11.如权利要求9所述的方法，其中所述芯片是pGOLD芯片。

12.如权利要求10所述的方法，所述方法包括结合至所述芯片的一种或更多种第二蛋白。

13.如权利要求11所述的方法，其中所述一种或更多种第二蛋白选自由IA2、GADA及其组合组成的组。

14.如权利要求1所述的方法，其中所述血清是人类血清。

15.如权利要求13所述的方法，其中所述人类血清用胎牛血清(FBS)进行稀释。

16.如权利要求14所述的方法，其中所述人类血清用所述胎牛血清(FBS)以10至30倍的范围进行稀释。

17.如权利要求1所述的方法，其中所述标记的捕获的自身抗体包含荧光标记物。

18.如权利要求16所述的方法，其中所述测量包括通过分析所述荧光标记物的荧光强度来确定与所述ZnT8蛋白结合的所述抗体的量。

19.如权利要求10所述的方法，其中测量与所述ZnT8蛋白结合的所述抗体包括红外扫描仪。

20.如权利要求1所述的方法，其中所述脂蛋白体包含选自包括以下的组的脂质：1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸-(1'-rac-甘油)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺及其组合。

21.如权利要求1所述的方法，其中所述检测具有大于70％灵敏度和大于90％特异度的检测性能。