[发明专利]结合NKG2D、CD16和肿瘤相关抗原的蛋白质

说明书

描述了结合NKG2D受体、CD16和选自5T4、GPNMB、FR‑α、PAPP‑A和GPC3的肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白，以及可用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法。

与相关申请的交叉引用

本申请要求2017年5月23日提交的美国临时专利申请号62/510,137、2017年5月23日提交的美国临时专利申请号62/510,168、2017年5月23日提交的美国临时专利申请号62/510,169、2017年5月23日提交的美国临时专利申请号62/510,167和2017年7月31日提交的62/539,425的利益和优先权，所述每个申请的内容为所有目的整体通过引用并入本文。

序列表

本申请含有以ASCII格式电子提交并整体通过引用并入本文的序列表。所述在2018年5月21日生成的ASCII拷贝被命名为DFY-018WO.txt，大小为144kb。

技术领域

本发明涉及结合到NKG2D、CD16和选自5T4、GPNMB、FR-α、PAPP-A和GPC3的肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白。

背景技术

尽管在文献中已报道了治疗癌症的大量研究尝试和科学进展，但这种疾病依然是显著的健康问题。一些最经常被诊断到的癌症包括前列腺癌、乳腺癌和肺癌。前列腺癌是男性中最常见的癌症形式。乳腺癌仍然是女性中死亡的主导原因。当前用于这些癌症的治疗选项不对所有患者有效和/或可能具有实质性严重副作用。其他类型的癌症对于使用现有治疗选项治疗来说也仍然具有挑战性。

癌症免疫疗法是理想的，因为它们是高度特异性的并且可以使用患者自己的免疫系统来促进癌细胞的破坏。融合蛋白例如双特异性T-细胞衔接器是文献中描述的结合到肿瘤细胞和T-细胞以促进肿瘤细胞破坏的癌症免疫疗法。结合到某些肿瘤相关抗原和结合到某些免疫细胞的抗体在文献中已有描述。参见例如WO 2016/134371和WO 2015/095412。

自然杀伤(NK)细胞是先天性免疫系统的组成部分，占循环淋巴细胞的大约15％。NK细胞事实上浸润所有组织，并且最初因它们不需前期致敏即可杀伤肿瘤细胞的能力而被表征。激活的NK细胞通过与细胞毒性T细胞相似的手段杀伤靶细胞，即通过含有穿孔素和颗粒酶的细胞溶解颗粒以及通过死亡受体途径。激活的NK细胞还分泌炎性细胞因子例如IFN-γ和促进其他白细胞向靶组织的召集的趋化因子。

NK细胞通过它们表面上的各种不同激活和抑制受体对信号做出响应。例如，当NK细胞遇到健康的自体细胞时，它们的活性通过杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的激活而被抑制。或者，当NK细胞遇到外来细胞或癌细胞时，它们通过它们的激活受体(例如NKG2D、NCR、DNAM1)而被激活。NK细胞也通过它们表面上的CD16受体被某些免疫球蛋白的恒定区激活。NK细胞对激活的总体灵敏度取决于刺激性和抑制性信号的总和。

人类滋养层糖蛋白5T4是一种N-糖基化的跨膜蛋白。它的表达在机制上与细胞通过上皮-间质转化的定向移动、CXCL12/CXCR4趋化性的促进以及在有利于非经典途径信号传导的同时经典的Wnt/β-连环蛋白途径的阻断相关。这些过程在发育中和成年人组织中受到高度调控，但它们帮助驱动癌细胞的扩散。已显示，5T4在正常成年人组织中具有非常有限的表达，但在许多癌症包括结肠直肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、肾癌和胃癌中是普遍的。

非转移性黑素瘤糖蛋白b(GPNMB)是一种I型跨膜蛋白，其与一种黑素细胞特异性蛋白pmel17前体显示出同源性。已报道GPNMB在各种不同的细胞类型中表达，包括：黑色细胞，破骨细胞，成骨细胞，树突状细胞。此外，它在各种不同类型的癌症包括黑素瘤、乳腺癌包括三阴性乳腺癌、骨肉瘤和神经胶质瘤/成胶质细胞瘤中高度表达。已显示，GPNMB促进肿瘤细胞的迁移、侵入和转移。