[发明专利]结合CD123和CD3的双特异性抗体

说明书

本发明涉及新颖的双特异性抗CD123 x抗CD3抗体。

相关申请的交叉引用

本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2017年6月1日提交的美国临时专利申请号62/513,763的优先权，将所述临时专利申请通过引用以其整体明确地并入本文，特别是对其中的附图、图例和权利要求的引用。

背景技术

基于抗体的治疗剂已经成功用于治疗多种疾病，包括癌症和自身免疫性/炎性障碍。然而，仍然需要对此类别的药物进行改进，特别是关于增强其临床功效。正在探索的一种方法是将另外的且新颖的抗原结合位点工程化进基于抗体的药物中，使得单一免疫球蛋白分子共接合两种不同的抗原。由于抗体可变区(Fv)相当大的多样性使得可能产生识别几乎任何分子的Fv，因此产生此类双特异性抗体的典型方法是将新的可变区引入抗体中。

已经探索出多种替代抗体形式用于双特异性靶向(Chames和Baty,2009,mAbs[单克隆抗体]1[6]:1-9；Holliger和Hudson,2005,Nature Biotechnology[自然生物技术]23[9]:1126-1136；Kontermann,mAbs[单克隆抗体]4(2):182(2012)，将所有这些文献通过引用明确地并入本文)。最初，通过使两种各自产生单一单克隆抗体的细胞系融合来制备双特异性抗体(Milstein等人,1983,Nature[自然]305:537-540)。尽管所得的杂交体杂交瘤或四价体瘤(quadroma)确实产生了双特异性抗体，但是它们只是少数群体，并且需要大量纯化以分离出所需的抗体。对此的工程化解决方案是使用抗体片段制备双特异物。由于此类片段缺少全长抗体的复杂的四级结构，因此可以在单一遗传构建体中连接可变轻链和重链。已经产生了许多不同形式的抗体片段，包括双抗体、单链双抗体、串联scFv和Fab₂双特异物(Chames和Baty,2009,mAbs[单克隆抗体]1[6]:1-9；Holliger和Hudson,2005,NatureBiotechnology[自然生物技术]23[9]:1126-1136；通过引用明确地并入本文)。尽管这些形式可以在细菌中高水平表达，并且由于其尺寸小而可能具有良好的渗透益处，但是它们在体内迅速清除，并且可能产生与其产生和稳定性相关的制造障碍。这些缺点的主要原因是抗体片段通常缺少具有其相关功能特性的抗体恒定区，所述相关功能特性包括较大的尺寸、高稳定性以及与在血清中维持长半衰期(即新生儿Fc受体FcRn)或用作用于纯化的结合位点(即蛋白质A和蛋白质G)的各种Fc受体和配体的结合。

最近的工作试图通过将双结合工程化进全长抗体样形式中来解决基于片段的双特异物的缺点(Wu等人,2007,Nature Biotechnology[自然生物技术]25[11]:1290-1297；USSN12/477,711；Michaelson等人,2009,mAbs[单克隆抗体]1[2]:128-141；PCT/US2008/074693；Zuo等人,2000,Protein Engineering[蛋白质工程]13[5]:361-367；USSN09/865,198；Shen等人,2006,J Biol Chem[生物化学杂志]281[16]:10706-10714；Lu等人,2005,JBiol Chem[生物化学杂志]280[20]:19665-19672；PCT/US2005/025472；通过引用明确地并入本文)。这些形式克服了抗体片段双特异物的一些障碍，主要是因为它们含有Fc区。这些形式的一个显著缺点是，由于它们在同二聚体恒定链之上建立新的抗原结合位点，因此与新抗原的结合总是二价的。