[发明专利]产生红系祖细胞的方法在审
申请号: | 201880044213.0 | 申请日: | 2018-07-02 |
公开(公告)号: | CN111373029A | 公开(公告)日: | 2020-07-03 |
发明(设计)人: | 劳伦斯·居约诺-哈尔曼德;卢瓦克·加伦;弗雷德里克·奥雷德;尼古拉斯·瑞贝格;弗雷德里克·雷莱克斯;卢克·杜艾 | 申请(专利权)人: | 法国血液机构;法国国家卫生及研究医学协会;索邦大学;巴黎第十二大学 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 金海霞;刘慧 |
地址: | 法国拉普莱*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 产生 红系祖 细胞 方法 | ||
1.一种产生红系祖细胞的体外方法,所述方法包括使造血干细胞与包含自噬诱导剂和糖皮质激素的细胞培养基接触。
2.权利要求1的方法,其中所述自噬诱导剂选自雷帕霉素小分子增强剂-28(SMER-28)、SMER-10和SMER-18,及其组合。
3.权利要求1或2的方法,其中所述自噬诱导剂是SMER-28。
4.权利要求1至3任一项的方法,其中所述糖皮质激素选自可的松、氢化可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、曲安西龙、帕拉米松、倍他米松、地塞米松、可的伐唑及其衍生物和混合物。
5.权利要求1至4任一项的方法,其中所述糖皮质激素选自泼尼松、泼尼松龙和地塞米松。
6.权利要求1至5任一项的方法,其中所述糖皮质激素是地塞米松。
7.权利要求1至6任一项的方法,其中所述培养基还包含缺氧诱导因子(HIF)通路激活剂,优选脯氨酰羟化酶(PHIS)抑制剂,更优选二甲基草酰甘氨酸(DMOG)。
8.权利要求1至7任一项的方法,其中所述造血干细胞是通过多能干细胞、特别是胚胎干细胞(ES)或诱导性多能干细胞(iPS)的分化而获得的,或是从患者血液样品、从脐带血或胎盘血或从骨髓样品中分离的。
9.权利要求1至8任一项的方法,其中所述造血干细胞是人类造血干细胞。
10.权利要求1至9任一项的方法,其中所述造血干细胞被遗传修饰成过表达选自人类端粒酶逆转录酶(HTERT)、B淋巴瘤Mo-MLV插入区1同源物(BMI1)、c-MYC、1-MYC和MYB的一种或多种基因。
11.权利要求1至10任一项的方法,其中所述造血干细胞被遗传修饰成过表达所述HTERT基因。
12.权利要求1至11任一项的方法,其中所述造血干细胞被遗传修饰成过表达所述BMI1基因。
13.权利要求1至10任一项的方法,其中所述造血干细胞被遗传修饰成过表达所述HTERT基因和所述BMI1基因。
14.权利要求1至13任一项的方法,其中选自人类端粒酶逆转录酶(HTERT)、B淋巴瘤Mo-MLV插入区1同源物(BMI1)、c-MYC、1-MYC和MYB的所述一种或多种基因被置于一种或多种诱导型启动子的控制下。
15.权利要求10至14任一项的方法,其中所述造血干细胞被进一步遗传修饰成过表达:
-一种或多种核心红系网络(CEN)通路转录因子,优选LIM仅结构域2(LMO2);和/或
-一种或多种EPO-R/JAK2/STAT5/BCL-XL通路基因,优选超大B细胞淋巴瘤(BCL-XL)。
16.权利要求10至14任一项的方法,其中所述造血干细胞被进一步遗传修饰成过表达所述BCL-XL基因。
17.权利要求10至14和16任一项的方法,其中所述造血干细胞被进一步遗传修饰成过表达所述LMO2基因。
18.权利要求15至17任一项的方法,其中选自EPO-R/JAK2/STAT5/BCL-XL通路基因的所述一种或多种基因,优选BCL-XL,被置于一种或多种组成型启动子的控制下。
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