[发明专利]植物中使用的抗CRISPR蛋白的方法和组合物在审
| 申请号： | 201880042315.9 | 申请日： | 2018-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN110891965A | 公开（公告）日： | 2020-03-17 |
| 发明（设计）人： | C.弗雷莫;P.霍瓦特;D.A.罗梅罗;A.海因斯;S.穆瓦诺;G.罗素;J.扬;M-L.李梅 | 申请（专利权）人： | 杜邦营养生物科学有限公司;拉瓦尔大学（加拿大） |
| 主分类号： | C07K14/005 | 分类号： | C07K14/005;C07K14/315;C12N5/10;C12N15/63 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 翟建伟;黄希贵 |
| 地址： | 丹麦哥*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 植物 使用 crispr 蛋白 方法 组合 | ||
1.一种调节细胞中Cas核酸内切酶对靶多核苷酸的活性的方法，所述方法包括向所述细胞提供抗CRISPR(ACR)多肽，其中所述抗CRISPR多肽调节所述细胞中Cas核酸内切酶的活性。
2.如权利要求1所述的方法，其中Cas核酸内切酶活性选自下组，该组由以下组成：靶多核苷酸结合、靶多核苷酸切口、靶多核苷酸双链断裂产生和靶多核苷酸修饰。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述靶多核苷酸修饰选自下组，所述组由以下组成：至少一个核苷酸的插入、至少一个核苷酸的缺失、至少一个核苷酸的取代、以及至少一个核苷酸的化学改变。
4.如权利要求1所述的方法，其中所述Cas核酸内切酶缺乏切口或切割多核苷酸的能力。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述Cas核酸内切酶可操作地连接至脱氨酶。
6.如权利要求5所述的方法，所述方法进一步包括：编辑所述靶多核苷酸的至少一个碱基。
7.如权利要求1所述的方法，其中与包含所述Cas核酸内切酶和指导RNA、但不包含所述抗CRISPR多肽的对照细胞相比，所述活性降低。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞选自下组，所述组由以下组成：植物细胞、动物细胞、哺乳动物细胞、微生物细胞、真菌细胞。
9.如权利要求1所述的方法，其中所述Cas核酸内切酶是II-A型Cas核酸内切酶。
10.如权利要求1所述的方法，其中所述Cas核酸内切酶是Cas9或Cpfl。
11.一种增加细胞中Cas核酸内切酶和指导多核苷酸复合物的特异性的方法，所述方法包括将抗CRISPR(ACR)多肽引入细胞，其中所述ACR多肽与所述Cas核酸内切酶相互作用。
12.如权利要求11所述的方法，其中与缺乏所述ACR多肽的对照细胞相比，所述Cas核酸内切酶的特异性改善了至少5％。
13.如权利要求11所述的方法，其中在特定的细胞周期阶段期间，所述ACR多肽与所述Cas核酸内切酶相互作用。
14.如权利要求9所述的方法，其中所述细胞选自下组，所述组由以下组成：植物细胞、动物细胞、哺乳动物细胞、微生物细胞、真菌细胞。
15.如权利要求13所述的方法，其中所述细胞周期阶段为减数分裂期间。
16.如权利要求13所述的方法，其中所述细胞周期阶段为有丝分裂期间。
17.如权利要求11所述的方法，其中所述ACR多肽在生物体发育的特定阶段期间调节所述Cas核酸内切酶的活性。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述阶段选自下组，所述组由以下组成：生长、生殖、营养和衰老。
19.如权利要求11所述的方法，其中所述Cas核酸内切酶和指导多核苷酸作为多核苷酸提供。
20.如权利要求11所述的方法，其中所述Cas核酸内切酶作为多肽提供，并且所述指导多核苷酸作为RNA分子提供。
21.如权利要求11所述的方法，其中所述ACR作为编码多肽的多核苷酸提供。
22.如权利要求11所述的方法，其中所述ACR作为多肽提供。
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