[发明专利]制造双特异性抗体的方法，双特异性抗体和此类抗体的治疗用途

权利要求书

1.一种适合在共同宿主细胞中共表达的双特异性抗体，其中所述抗体包含：

a.第一部分，所述第一部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有λ野生型的第一可变轻链(VL1)和野生型的第一可变重链(VH1)以及带有杂二聚化修饰的第一恒定重链(CH1)，所述VH1特异性结合至第一靶标，以及

b.第二部分，所述第二部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有κ野生型的第二可变轻链(VL2)和野生型的第二可变重链(VH2)以及带有与所述第一恒定重链的杂二聚化修饰互补的杂二聚化修饰的第二恒定重链(CH2)，所述VH2与不同于所述第一靶标的第二靶标特异性结合，

其中当所述第一部分和所述第二部分在共同宿主细胞中共表达时，形成双特异性抗体。

2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中所述第一和第二恒定重链是人IgA、IgD、IgE、IgG或IgM，优选IgD、IgE或IgG，例如人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4，优选IgG1。

3.根据权利要求2所述的双特异性抗体，其中其中所述第一可变轻链是λ1型，并且所述第二可变轻链是κ6型。

4.根据权利要求3所述的双特异性抗体，其中所述第一和第二恒定重链是IgG1，并且其中

a.所述第一恒定重链具有产生杵结构的点突变，并且所述第二恒定重链具有产生臼结构的点突变，或

b.所述第一恒定重链具有产生臼结构的点突变，并且所述第二恒定重链具有产生杵结构的点突变，并且任选地

c.所述第一和第二恒定重链具有导致二硫键的突变。

5.根据前述权利要求中任一项所述的双特异性抗体，其包含第一免疫球蛋白VH1结构域、第一免疫球蛋白VL1结构域、第二免疫球蛋白VH2结构域和第二免疫球蛋白VL2结构域，其中：

a.所述第一免疫球蛋白VH1结构域包含(例如依次)：

i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:76，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:77，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:78；或

ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:79，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:80，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:81；和

b.所述第一免疫球蛋白VL1结构域包含(例如依次)：

i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:92，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:93，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:94或

ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:95，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:96，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:97；和

c.所述第二免疫球蛋白VH2结构域包含(例如依次)：

i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:44，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:45，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:46；或

ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:47，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:48，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:49；和

d.所述第二免疫球蛋白VL2结构域包含(例如依次)：

i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:60，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:61，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:62或

ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:63，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:64，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:65。