[发明专利]微小物质检测方法及微小物质检测用装置

说明书

本发明提供：作为能够利用简易操作将核酸、蛋白质、病毒及细胞等检测对象物质封入极小容积的液滴中进行高灵敏度检测的技术，检测容纳于互相分开形成的多个容器内的微小物质的方法，其包括：(1)将包含上述微小物质的溶剂导入到下层部与上层部之间的空间的步骤，所述下层部中形成有所述容器，所述上层部与所述下层部中形成所述容器的面相对；以及(2)将气体导入上述空间，在上述容器内形成包含上述微小物质的溶剂的液滴的步骤；以及(3)光学、电和/或磁性检测在上述液滴内存在的上述微小物质的步骤。

技术领域

本发明涉及微小物质检测方法及微小物质检测用装置。更具体而言，涉及在基板上互相分开形成的多个容器内形成封入微小物质的微小的液滴，光学、电和/或磁性检测该液滴内存在的微小物质的方法等。

背景技术

为了进行疾病、传染病等的诊断，因此，要求用于迅速、简便，且高灵敏度地检测核酸、蛋白质、病毒及细胞等的标记的技术。例如，从在体积1mm³的肿瘤中包含的100万个癌症细胞将标记蛋白(从各细胞各100分子)分泌到5L的血中的情况下，标记蛋白的血中浓度为30aM左右。要求对这样的浓度非常低的物质也能够检测的技术。

作为这样的技术，存在“单分子酶测定”：其将核酸、蛋白质、病毒及细胞等检测对象物质封入极小容积的液滴中，通过使用了标记抗体的免疫学手段进行检测。利用单分子酶测定，能够将检测对象物质以一分子单位的灵敏度进行检测。

在专利文献1中，作为能够应用于单分子酶测定的技术，公开了“一种颗粒封入方法，其特征在于包括：颗粒导入步骤，其是向下层部与上层部之间的空间导入包含颗粒的亲水性溶剂，该下层部中形成有多个仅可以收容1个所述颗粒的收容部，多个所述收容部被具有疏水性的上表面的侧壁互相隔开，该上层部与该下层部的形成有所述收容部的面相对向；疏水性溶剂导入步骤，其在所述颗粒导入步骤之后向所述空间导入疏水性溶剂”。

专利文献1所公开的技术，使用了“一种阵列，其特征在于：其具备下层部及上层部，所述下层部中形成有多个收容部，该多个收容部被具有疏水性的上表面的侧壁互相隔开，所述上层部与所述下层部的形成有所述收容部的面以隔着空间的方式而相对向”，其使用的是具有下层部和上层部隔着空间相对的流通池结构的阵列。根据该技术，认为“可以将大量颗粒高效地封入阵列中，因此能够以高灵敏度检测出低浓度的靶分子”。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开2012/121310号

专利文献2：日本特开2004-309405号

发明内容

发明所要解决的问题

本发明的主要目的在于提供用于利用简易的操作，将核酸、蛋白质及病毒等检测对象物质封入极小容积的液滴中，能够进行高灵敏度的检测的技术。

解决问题的方法

为了解决上述课题，本发明提供以下[1]～[20]。

[1]检测微小物质的方法，所述微小物质容纳于互相分开形成的多个容器内，其包括：

(1)将包含上述微小物质的溶剂导入到下层部与上层部之间的空间的步骤，所述下层部中形成有所述容器，所述上层部与所述下层部中形成所述容器的面相对，以及

(2)将气体导入上述空间，在上述容器内形成包含上述微小物质的溶剂的液滴的步骤，以及

(3)光学、电和/或磁性检测在上述液滴内存在的上述微小物质的步骤。

[2]基于生色底物的吸光度变化和/或荧光的光学检测微小物质的方法，所述微小物质容纳于互相分开形成的多个容器内，其包括：