[发明专利]用于提取糖链抗原并进行测定的免疫色谱装置

说明书

提供一种免疫色谱方法和免疫色谱装置，在在免疫色谱试验片上通过亚硝酸提取来提取糖链抗原并进行测定的免疫色谱法中，通过用充足的时间进行亚硝酸提取处理能够实现足够的灵敏度的测定。免疫色谱装置包括免疫色谱试验片和存放该试验片的容器，并在试验片的样品垫上具有检体添加口，该免疫色谱试验片包括：添加与亚硝酸盐或酸性溶液混合而得的检体的样品垫、包含将糖链抗原的抗体标记而得的标记抗体的标记体区域及将所述糖链抗原的抗体进行了固相化的检测区域，在检测区域形成抗体‑糖链抗原‑标记抗体复合体，并对糖链抗原进行测定，该免疫色谱试验片在所述标记体区域的上游具有含浸有中和试剂的区域，进一步，在该含浸有中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而得的检体的情况下具有含浸有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而得的检体的情况下具有含浸有亚硝酸盐的区域，该免疫色谱试验片用于提取并测定检体中的糖链抗原，其中，(i)该免疫色谱装置具有用于保持添加的检体样本溶液并通过将检体样本溶液在短时间内供给至含浸有所述固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域来促进亚硝酸盐和固态酸性试剂对糖链抗原的提取的较大的检体添加口；(ii)添加口与样品垫之间没有间隙，使得样本不从添加口旁溢。

技术领域

本发明涉及一种能够在免疫色谱试验片上进行糖链抗原的亚硝酸提取处理的、用于提取并测定糖链抗原的免疫色谱装置。

背景技术

很多以免疫色谱法为原理的快速诊断试剂被作为快速且简便地测定病毒或细菌感染症、并确定治疗方案的一种手段而广泛使用。

一般的以免疫色谱法为原理的快速诊断试剂能够通过将检体悬浮于检体悬浮液后，将该悬浮液供给至免疫色谱试验片来快速且简便地进行测定。

为了检测A组β溶血性链球菌(A组β溶链菌)、口腔内链球菌等属于链球菌属的微生物，需要提取糖链抗原，并对糖链抗原进行测定。

例如，报告有通过如下操作即可在免疫色谱试验片上进行亚硝酸提取处理的方法：事先使免疫色谱试验片含有亚硝酸钠和中和试剂，将检体悬浮于乙酸等酸性溶液并供给至免疫色谱试验片(专利文献1)。

此外，还有如下方法：事先使免疫色谱试验片含有酸性试剂和中和试剂，将检体悬浮于亚硝酸盐并供给至免疫色谱试验片。

在免疫色谱法中，有时需要控制免疫色谱试验片中的色谱展开速度，已报告有通过装置形状进行控制、通过贴合位置进行控制、通过使用的原材料(无纺布等材料)进行控制、通过试剂进行控制等形式的免疫色谱法(专利文献2和3)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际专利公开WO2005/121794号公报

专利文献2：日本特开2005-331471号公报

专利文献3：日本特开2005-331463号公报。

发明内容

发明要解决的课题

为了检测A组β溶血性链球菌(A组β溶链菌)、口腔内链球菌等属于链球菌属的微生物，提取糖链抗原并对糖链抗原进行测定。

为了提取糖链抗原，需要使用亚硝酸。由于亚硝酸单独使用时不稳定，所以进行亚硝酸提取时，通过将亚硝酸盐溶液与酸溶液(醋酸、柠檬酸和/或酒石酸等)现场混合产生亚硝酸来进行抗原提取。

用免疫色谱法检测时，将亚硝酸溶液或酸溶液的任意一方涂布并干燥，编入免疫色谱试验片即可。在这种试剂形态中，与液态试剂相比，不需要试剂的混合操作所以操作简便，另一方面也存在如下课题：试剂混合后，像常规的免疫色谱法那样，如果样本在短时间内展开，则由于亚硝酸提取处理未能充分进行，因此灵敏度不足。

在将液态试剂混合进行亚硝酸提取的试剂形态中，通常用1～2分钟提取样本。因此，为了得到与液态形态同等的灵敏度，需要将样本在中和的上游保持1～2分钟。