[发明专利]用于癌症免疫疗法的MR1限制性T细胞受体

权利要求书

1.一种分离表达T细胞受体的T细胞的方法，所述T细胞受体能够特异性结合由与MR1分子关联的癌细胞呈递的抗原，所述方法包含以下步骤：

a.提供T细胞制剂；然后

b.在接触步骤中使所述T细胞制剂与表达MR1的癌细胞接触；

c.在分离步骤中将与所述癌细胞特异性反应的T细胞分离。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述接触步骤包含扩增步骤，其中所述分离的T细胞制剂在所述表达MR1的癌细胞的存在下扩增。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述扩增步骤在IL-2和/或IL-7和/或IL-15的存在下进行。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分离步骤包含利用对CD3、CD69、CD137、CD150和/或ICOS的细胞表面标记物具有特异性的配体染色所述T细胞制剂，特别是其中所述分离步骤包括选定CD3⁺CD137⁺、和/或CD3⁺ CD69⁺、和/或CD3⁺ CD150⁺、和/或CD3⁺ICOS⁺ T细胞，之后进行流式细胞术分析和细胞分选，特别是通过使用FACS或磁分离进行细胞分选。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述对细胞表面标记物具有特异性的配体是抗体或类抗体分子。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分离步骤包含选定这样一种T细胞，当用表达MR1的细胞刺激时，与用不表达MR1的细胞刺激相比，其从选自IFN-γ和/或GM-CSF的细胞因子释放两倍的表达量。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还包括确定用于编码在所述分离步骤中分离的T细胞的T细胞受体的核酸序列。

8.一种制备表达T细胞受体的MR1T细胞制剂的方法，所述T细胞受体能够结合由与MR1分子关联的癌细胞呈递的抗原，所述方法包括以下步骤：

a.提供从患者获得的肿瘤样品；

b.将所述肿瘤样品与以下物质接触：

i.多个T细胞克隆，其中每个T细胞克隆的特征在于具有MR1T细胞受体，其能够特异性地结合由与MR1分子关联的癌细胞呈递的抗原；或者

ii.从MR1T细胞受体分子中分离的多个被标记和多聚化的可溶性TCR。

c.识别与所述肿瘤样品特异性反应的MR1T细胞受体；

d.提供T细胞制剂；

e.将一核酸表达构建体引入所述T细胞制剂从而产生转基因T细胞制剂，所述核酸构建体编码在所述T细胞克隆上表达的MR1反应性T细胞受体分子，其在步骤c中被识别出与所述肿瘤样品特异性反应。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述T细胞制剂是从同一患者处获得(自体过继性T细胞疗法)。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述T细胞制剂从另一个受试者获得，特别是HLA匹配的受试者(同种异体过继性T细胞疗法)。