[实用新型]一种小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定试剂盒

说明书

本实用新型公开了一种小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定试剂盒，包括大箱体和箱盖，所述大箱体内部的一侧设有第一小盒体，大箱体内部的另一侧并列设置有第二小盒体和冰袋放置区，所述大箱体的上方安装有箱盖。本实用新型该试剂盒提供了小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定过程中涉及到的所有试剂，并且提供了一套高效的细胞分离、培养方案，实验人员可参照试剂盒说明书、使用试剂盒内的试剂，方便、快捷地完成相关细胞分离、培养实验；既减少了时间、精力的消耗，又提高了目的细胞的活性及质量；同时，提供了一套鉴定方法及相关试剂，确保最终实验结果的准确性。

技术领域

本实用新型涉及生物技术领域，具体为一种小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定试剂盒。

背景技术

骨关节炎（Osteoarthritis，OA）为一种退行性病变，系由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生，又称骨关节病、退行性关节炎、老年性关节炎、肥大性关节炎等。临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。

骨关节炎是全球范围内最常见的疾病之一，其病变部位产生的肿胀、疼痛、肌肉萎缩及肌无力等功能障碍严重影响着患者的生活质量。随着年龄的增长，骨关节炎的发生率逐渐增加，它是老年人疼痛和致残的主要原因。随着社会老龄化进程，该病的防治变得越来越重要。目前，防治该病的重点之一即保护退变的关节软骨。

软骨组织由软骨细胞和软骨基质构成，软骨细胞是软骨组织中唯一的细胞成分；软骨基质由软骨细胞产生和分泌，主要成分为Ⅱ型胶原和蛋白多糖，其中多糖以酸性糖胺多糖为主。在软骨移植修复及软骨病变发生机制的研究中，常常需要借助体外培养技术获得保持着分化特性的软骨细胞。由于临床病例标本获得较为困难，因此，众多关于该病的发病机制、药物预防及治疗的研究多建立于动物模型中进行。从实验动物关节中获取关节软骨细胞，并进行体外培养，而后对体外培养细胞进行干预就变得尤为重要。但软骨细胞包埋于软骨陷窝内，周围包裹着大量的Ⅱ型胶原和蛋白多糖等大分子结构，因此软骨细胞的获得与体外培养存在一定的难度。

目前，软骨组织多通过酶解的方式从中游离出软骨细胞，然后经细胞筛网过滤得到最终目的细胞，但所需相关酶甚多(睾丸透明质酸酶、胰蛋白酶、胶原酶等)，且消化时间较长，容易破坏软骨细胞的活性，导致最终细胞得率及存活率较低，关节软骨细胞生长周期慢。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定试剂盒，该试剂盒包含小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定所需的各种试剂，可供实验人员直接使用。

为实现上述目的，本实用新型提供如下技术方案：一种小鼠关节软骨细胞分离、培养、鉴定试剂盒，包括大箱体和箱盖，所述大箱体内部的一侧设有第一小盒体，大箱体内部的另一侧并列设置有第二小盒体和冰袋放置区，所述第一小盒体内固定有第一泡沫试剂架，第一泡沫试剂架上设有组织清洗液放置区、消化酶Ⅰ放置区、消化酶Ⅱ放置区、消化酶Ⅲ放置区、细胞洗涤液放置区、细胞培养液放置区、生长添加剂放置区，所述第二小盒体内固定有第二泡沫试剂架，第二泡沫试剂架上设有固定液放置区、表面活性剂放置区、封闭液放置区、洗液放置区、一抗放置区、荧光二抗放置区、细胞核染料放置区、封片液放置区，所述大箱体的上方安装有箱盖，且箱盖的内侧设有与第一小盒体、第二小盒体、冰袋放置区相互配合的凹槽。

优选的，所述第一小盒体与第二小盒体和冰袋放置区之间、第二小盒体与冰袋放置区之间均固定有防震泡沫板。

优选的，所述组织清洗液放置区内放置有一个盛放100mL组织清洗液的无菌、密封塑料方瓶，且组织清洗液主要由磷酸盐缓冲液、青-链霉素组成。

优选的，所述消化酶Ⅰ放置区内放置有一个盛放50mL消化酶Ⅰ的无菌、密封试剂瓶，且消化酶Ⅰ主要由胰蛋白酶组成。